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深藍云直播課堂 | 單重PCR到多重PCR實驗設(shè)計

來源:艾普拜生物科技(蘇州)有限公司 2021年05月08日 09:23

PCR技術(shù)以特異性的寡核苷酸引物放大擴增特定的DNA片段,一對引物在單次反應(yīng)擴增單個基因。通常每個靶標(biāo)分別進行檢測,即單重PCR反應(yīng),但當(dāng)我們需要檢測多個靶標(biāo)基因時,單重PCR費時費力同時無法排除不同樣品孔間的加樣差異,如內(nèi)參基因的歸一化檢測,需要在同一反應(yīng)管中檢測內(nèi)參基因和目標(biāo)基因,多重PCR實驗無疑是簡單直接的解決方案。

多重PCR也稱復(fù)合PCR,是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上改進并發(fā)展起來的一種PCR擴增技術(shù),即可在一個反應(yīng)體系中加入兩對以上引物,同時擴增出多個核酸片段。在熒光定量PCR(qPCR)和數(shù)字PCR(digital PCR)技術(shù)中,多重PCR設(shè)計配合多熒光通道可以進行更多靶標(biāo)的相對于標(biāo)準品的檢測和直接的定量檢測,既具有單重PCR的敏感性和特異性,同時又比單重PCR更加高效、快捷和經(jīng)濟。

多重PCR實驗具體如何進行?又有哪些注意事項?實時熒光定量PCR和數(shù)字PCR如何和多重PCR結(jié)合?北京深藍云生物科技有限公司云課堂將為您答疑解惑。

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