高通量基因敲除服務(wù)檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

“敲除”相關(guān)哺乳動物基因是研究基因功能或其作為藥物靶點潛力的一種重要方法，在阿爾茨海默病、癌癥、心血管疾病、炎癥或代謝疾病等神經(jīng)退行性疾病研究中都被廣泛應(yīng)用。CRISPR/Cas9是一種革命性的基因編輯技術(shù)，可以jīngquè修改基因組序列。CRISPR是細菌和古細菌中的一種免疫系統(tǒng)，能夠識別并切割入侵病毒的基因組。通過引入Cas9蛋白和相應(yīng)的向?qū)NA，CRISPR/Cas9技術(shù)可以jīngquè定位和切割特定的DNA序列，實現(xiàn)基因敲除、點突變和基因插入。CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因編輯具有巨大的臨床應(yīng)用潛力，隨著該技術(shù)的日趨成熟，其在藥物靶點發(fā)現(xiàn)和驗證、基因功能研究、基因治療、癌癥免疫療法等眾多領(lǐng)域發(fā)揮著越來越重要的作用。

CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)

為滿足基礎(chǔ)研究及醫(yī)藥研發(fā)的需求，科研領(lǐng)域急需獲得系列靶基因/全基因組的敲除細胞。百泰派克生物科技（BTP）采用優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)為您提供高通量基因敲除服務(wù)，我們的人全基因組基因敲除陣列Array文庫覆蓋了完整的人類全基因組，全基因組陣列敲除庫已在人原代細胞全部完成高內(nèi)涵篩選的驗證，超過80%以上的靶點達到70%以上的敲除效率。

BTP致力于為您提供zuì簡單易用的高通量CRISPR基因敲除服務(wù)，包括病毒包裝、質(zhì)粒制備、Cas9濃度測試等，為您解決選擇哪個細胞進行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等關(guān)鍵問題?？蛇M行單/多基因敲除、移碼突變和大序列敲除。您只需提供基因名和目標細胞，百泰派克生物科技負責所有項目后續(xù)，包括項目評估（靶基因是否在目標細胞中表達、是否是必需基因）、KO實驗、KO細胞驗證、凍存KO細胞和活KO細胞交付。

服務(wù)優(yōu)勢

1.樣本適用性強

適用于人、小鼠的細胞系，原代細胞，免疫細胞及iPS細胞等。

2.基因必要性及表達量分析

在進行基因敲除實驗前，我們會基于生物信息學和蛋白質(zhì)組學數(shù)據(jù)對不同細胞中基因必要性及表達量進行分析，確保實驗的可行性，降低實驗風險。

3.gRNA無需從頭設(shè)計和驗證

我們完成了人類全基因組gRNA的全部驗證，與藥物相關(guān)的靶點也完成了PCR測序驗證，無需針對客戶的靶點設(shè)計預(yù)實驗進行g(shù)RNA驗證，大大縮短了項目周期。

4.高通量高效率

我們采用優(yōu)化的CRISPR/Cas9系統(tǒng)進行高通量基因敲除，多個sgRNA/靶基因設(shè)計保證高敲除效率，超過80%靶點敲除效率在70%以上，短期內(nèi)（10天內(nèi)）即可提供高敲除效率的KO pool，滿足絕大多數(shù)的應(yīng)用場景。

5.敲除效率雙驗證

基因敲除后，我們采用WB實驗中抗體KO驗證的shǒuxuǎn方法——Sanger測序和深度蛋白質(zhì)組學技術(shù)對敲除效率進行雙驗證，數(shù)據(jù)真實性的雙重保障。

應(yīng)用案例

1.基因治療

Dever DP, et al. Nature. 2016.

2.免疫細胞工程

3.基因功能研究

4.藥物靶點篩選

常見問題：

問題1.高通量基因敲除技術(shù)對比傳統(tǒng)基因敲除技術(shù)有哪些優(yōu)勢？

回答：高通量基因敲除技術(shù)相比傳統(tǒng)基因敲除技術(shù)如慢病毒包裝法和質(zhì)粒法等有以下優(yōu)勢:

1）編輯通量

• 傳統(tǒng)基因敲除技術(shù):通量低，通常2-3個月完成幾十個敲除細胞系的構(gòu)建；

• 高通量基因敲除技術(shù):通量高，通常1-2個月即可獲得幾百個敲除細胞系的構(gòu)建。

2）編輯效率

• 傳統(tǒng)基因敲除技術(shù):敲除效率在30-90%左右，且不均一；

• 高通量基因敲除技術(shù):敲除效率很高，可達70-100%。

3）KO細胞儲量

• 傳統(tǒng)基因敲除技術(shù):KO細胞儲備不足3000+；

• 高通量基因敲除技術(shù):人類全基因組覆蓋，KO細胞儲備高達19000+。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質(zhì)序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質(zhì)N端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的蛋白質(zhì)，提供基于從頭測序法的蛋白質(zhì)從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質(zhì)組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量蛋白質(zhì)組學、靶向蛋白質(zhì)組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質(zhì)組學分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質(zhì)組學服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質(zhì)標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質(zhì)、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋蛋白質(zhì)組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

高通量基因敲除服務(wù)檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹