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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標物>行業(yè)專用試劑>生物試劑> 豬脂肪原代細胞

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豬脂肪原代細胞

參考價1-580/件
具體成交價以合同協(xié)議為準
產(chǎn)品標簽

豬脂肪脂肪組織原代細胞

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上海研生實業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學實驗產(chǎn)品,包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、等多個研究及應用領域。旗下有“上研生”品牌。


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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7007 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗

本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

豬脂肪原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的豬脂肪采用消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的豬脂肪經(jīng)油紅O染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

豬脂肪原代細胞

組織來源

脂肪組織

英文名稱

Porcine Adipocyte   Cells

貨號

YS-01X7007

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

豬脂肪原代細胞
細胞簡介:

豬脂肪細胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應,參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色(棕色)脂肪細胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數(shù)量達到巔,此后數(shù)量一般不再增加。細胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質泡,富含光面內(nèi)質網(wǎng)。此外,還有一種褐色脂肪細胞,在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團縮的褐色脂肪,作用是將脂質分解產(chǎn)熱,調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質比例。

培養(yǎng)信息:

豬脂肪原代細胞

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

豬脂肪原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

豬脂肪原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

公司產(chǎn)品:豬脂肪原代細胞

人羊膜細胞;HA

鋅指蛋白IKAROS抗體

小鼠增殖細胞核抗原單克隆抗體

細胞分裂周期蛋白25B抗體

上皮特異性抗原抗體

成熟T淋巴細胞增殖蛋白1抗體

1號染色體開放閱讀框226抗體

脫酸A結構域蛋白抗體

9號染色體開放閱讀框41抗體

酸化組蛋白H1抗體

NA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 氨酸酶 (Neuraminidase   / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2 大鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL

卵巢癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml

PILRA Others Human PILR-alpha / PILRA 人細胞裂解液 (陽性對照)

HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素   (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

S100A8 Others Human S100A8 / CAGA / p8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠   AXR2 / CMG2 人細胞裂解液 (陽性對照)

SPINK4 Others Mouse 小鼠 SPINK4 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0412PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

豬脂肪原代細胞成熟T淋巴細胞增殖蛋白1抗體

PRAP1 Others Human PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照)

FRhK-4(恒河猴胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2

人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞;ERA-2

GRN Others Mouse 小鼠 GRN / Granulin 人細胞裂解液 (陽性對照)

恒河猴腎細胞;RM-2 人骨髓樣甲狀腺癌細胞,TT細胞 TE-10(食管癌細胞)

4號染色體開放閱讀框44抗體

Kelch樣蛋白14抗體

CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人細胞裂解液 (陽性對照)

α-連環(huán)蛋白抗體(鈣粘蛋白相關蛋白)Catenin α

核結構蛋白5抗體

生長激素抗體

NA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 氨酸酶 (Neuraminidase   / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

 


操作步驟:

豬脂肪原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。





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