Far-Western Blot分析檢測技術(shù)服務詳情介紹

Far-Western Blot是一種基于Western Blot技術(shù)的分子生物學方法，可用于檢測體外dànbáizhì與dànbáizhì的相互作用，尤其是不需要目標dànbáizhì的天然結(jié)構(gòu)的相互作用檢測。

Far-Western Blot技術(shù)的整體工作流程與Western Blot相似，只是Western Blot中探測目標dànbáizhì需要抗體，而Far-Western Blot分析中不需要抗體，而是使用經(jīng)過純化和標記的“誘餌”蛋白來探測和檢測膜上的目標蛋白。在Western Blot和Far-Western Blot中，dànbáizhì都是通過SDS凝膠和native PAGE凝膠對樣品進行分離，然后將dànbáizhì從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。轉(zhuǎn)模后，用BSA進行封閉。在膜上對dànbáizhì進行變性和復性，及后續(xù)的檢測步驟。Far-Western Blot技術(shù)用商業(yè)化的高度純化的誘餌蛋白將膜標記上探針。在誘餌蛋白與目標蛋白反應后，根據(jù)所使用的誘餌蛋白，可以檢測到與該目標蛋白相對應的條帶。

為了鑒定與給定蛋白相互作用的蛋白，F(xiàn)ar-Western Blot是一個實驗成本低、靈敏度高的有效平臺。遠western blotting的原理是對western blotting的改進，以自然折疊的重組蛋白作為dìyī個探針，與轉(zhuǎn)染到PVDF膜上的蛋白相互作用。Far-Western Blot使用的第二個探針是針對給定蛋白的特異性抗體，而酶標的第三個探針是針對第二個探針的抗體。當與LC-MS-MS蛋白鑒定相結(jié)合時，可以對得到的蛋白斑點(或蛋白條帶)進行表征，然后進行進一步的功能分析，如蛋白免疫沉淀等。

Far-Western Blot分析時，當需要保留dànbáizhì的天然構(gòu)象和天然相互作用時需要注意以下問題：1）變性條件下在SDS凝膠中分離的dànbáizhì可能會發(fā)生變性，而變性蛋白可能不會與誘餌蛋白發(fā)生反應，從而導致無法識別出相互作用。2）在結(jié)合之前將dànbáizhì變性并復性，也可能導致dànbáizhì發(fā)生構(gòu)象變化，從而影響靶蛋白與誘餌蛋白的結(jié)合。3）如果結(jié)合位點受其它因素影響，失去與誘餌蛋白的結(jié)合能力，使誘餌蛋白無法與之反應，也可能導致相互作用檢測失敗。更棘手的是，以非天然構(gòu)象呈現(xiàn)的dànbáizhì可能以新的非天然方式發(fā)生相互作用，導致檢測假陽性。

百泰派克生物科技提供Far-Western Blot分析服務，可以根據(jù)您的需求定制實驗，并對可能影響結(jié)果的潛在因素進行評估。我們承諾給出的數(shù)據(jù)可靠，且可重復性高。

Far-Western Blot分析的優(yōu)勢

• 可用于體外dànbáizhì相互作用研究 • 分析蛋白的結(jié)合域 • 比較dànbáizhì結(jié)合的親和力 • 無需特異性抗體

Far-Western Blot分析的工作流程

• 定量dànbáizhì，并通過SDS或native PAGE分離 2. 將dànbáizhì從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上 3. 將dànbáizhì進行變性和復性，以保證膜上的dànbáizhì結(jié)合位點充分暴露 4. BSA緩沖液對膜進行封閉 5. 將膜與純化的誘餌蛋白進行孵育 6. 檢測誘餌蛋白信號 7. 圖像分析及報告交付

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學優(yōu)質(zhì)服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務!

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