肌鈣蛋白I心臟 - 人類

貓編號(hào) 8T53

本數(shù)據(jù)表僅提供信息。點(diǎn)擊下面的按鈕將產(chǎn)品添加到購(gòu)物車后，您將看到是否有批量折扣。

• 貓編號(hào)。

8T53

• 來(lái)源：

人類心肌組織。

從器官捐贈(zèng)者采集的血液樣本檢測(cè)結(jié)果顯示，其為乙肝表面抗原、HIV-1和HIV-2抗體、丙肝病毒和梅毒螺旋體陰性。

• 應(yīng)用程序：

TnI是肌鈣蛋白的抑制亞基，肌鈣蛋白是細(xì)肌絲調(diào)節(jié)復(fù)合物，賦予骨骼肌肌動(dòng)蛋白-肌球蛋白ATP酶活性對(duì)鈣的敏感性。

TnI 存在三種同工酶，一種對(duì)應(yīng)于慢肌骨骼肌，一種對(duì)應(yīng)于快肌骨骼肌，一種對(duì)應(yīng)于心肌。兩種骨骼肌 (skTnI) 和一種心肌 TnI 形式的氨基酸序列有 40% 的差異。此外，人類心肌 TnI 在其 N 末端區(qū)域有骨骼肌形式所沒(méi)有的額外氨基酸殘基，這使得這種蛋白質(zhì)成為指示心臟特異性的有前途的分析物。在心肌梗死 (MI) 發(fā)生后的前 15 小時(shí)內(nèi)，心肌 TnI 的釋放模式與 CK-MB 相似，但在血清中保持升高長(zhǎng)達(dá) 6 天。這種觀察和心肌 TnI 的獨(dú)氨基酸序列使其成為 MI 的重要診斷標(biāo)志物。

TnI 適用于免疫檢測(cè)中的標(biāo)準(zhǔn)，用于早期檢測(cè)心肌梗死、生產(chǎn)抗血清的免疫原和標(biāo)記物用于碘化。

• 分析：

純度 > 98 % (SDS-PAGE)。

免疫印跡法用特異性單克隆抗體與肌鈣蛋白I心臟亞型反應(yīng)，確認(rèn)免疫活性。

TnI 濃度通過(guò)分光光度法測(cè)定，使用 A (0.1 %, 280 nm, 1 cm) 等于 0.42。該系數(shù)是根據(jù)人類 cTnI 的氨基酸組成 (FEBS Lett, 270, 57-61) 計(jì)算得出的。

• 展示：

從0.01 M鹽酸凍干。

建議用Tris/尿素緩沖液（20 mM Tris，pH 7.5，7 M尿素，5 mM EDTA，15 mM 2-基乙醇）將此產(chǎn)品重新溶解至接近1 mg/ml的濃度。

在中性pH值和生理鹽濃度下溶解度有限。

• 存儲(chǔ)：

凍干 -20°C（允許 -15 … -30 °C）
再溶解 -70°C（允許 -65 … -80 °C）

• 其他信息：

避免反復(fù)凍融。建議在重組成分后分裝。

• 材料安全注意事項(xiàng)：

此產(chǎn)品僅售用于研究或進(jìn)一步制造。處理此材料時(shí)應(yīng)遵循標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室操作程序。

 技術(shù)說(shuō)明

血液凝固與貧血•骨代謝•心臟標(biāo)志物•生育與妊娠•激素標(biāo)志物•免疫學(xué)與血清學(xué)•傳染病•炎癥•腎臟疾病•代謝綜合征•神經(jīng)科學(xué)•甲狀腺疾病•腫瘤標(biāo)志物•獸醫(yī)學(xué)

 嵌合型心肌肌鈣蛋白I抗體

與嗜異性抗體相關(guān)的問(wèn)題已被認(rèn)知數(shù)十年。盡管對(duì)嗜異性抗體在普通人群中流行率的估計(jì)差異較大，但普遍認(rèn)為至少達(dá)到10%（1）。

當(dāng)人體接觸不同動(dòng)物或動(dòng)物源制品時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生嗜異性抗體。這些抗體通常為人類抗小鼠（HAMA）、抗兔、抗山羊、抗綿羊、抗牛、抗豬、抗大鼠或抗馬抗體。在免疫診斷領(lǐng)域，該問(wèn)題最常與HAMA相關(guān)，因?yàn)榇蠖鄶?shù)診斷檢測(cè)都使用小鼠源抗體。

 HAMA可能導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果

在診斷檢測(cè)中，HAMA可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果，有時(shí)也會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果（2-3）。假陽(yáng)性結(jié)果是由HAMA對(duì)檢測(cè)抗體的交聯(lián)作用引起的，而當(dāng)HAMA與檢測(cè)抗體結(jié)合并由此阻斷抗原結(jié)合時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生假陰性結(jié)果（見(jiàn)圖1）。

![圖1. 人類抗小鼠抗體（HAMA）可在免疫測(cè)定中引起假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果。

假陽(yáng)性結(jié)果可能會(huì)延誤正確診斷，若該檢測(cè)用于急性心肌梗死（AMI）等危及生命疾病的診斷，甚至?xí)?dǎo)致不必要的住院治療（4）。一項(xiàng)針對(duì)因疑似心肌梗死（MI）而接受心肌肌鈣蛋白I檢測(cè)的受試者研究發(fā)現(xiàn)，HAMA在cTnI升高的受試者中導(dǎo)致5.5%的假陽(yáng)性，在cTnI升高但肌酸激酶正常的受試者中導(dǎo)致14%的假陽(yáng)性（5）。

為解決HAMA帶來(lái)的問(wèn)題，大多數(shù)檢測(cè)方法制造商在檢測(cè)開(kāi)發(fā)過(guò)程中會(huì)采取額外措施。常用的程序是使用阻斷試劑抑制非特異性結(jié)合，這些試劑從普通小鼠IgG到更精細(xì)的配方不等。盡管在大多數(shù)情況下這些措施是足夠的，但確實(shí)會(huì)在材料和人工方面增加額外成本。使用Fab片段也可以抑制HAMA的影響，但這同樣增加了一個(gè)生產(chǎn)步驟，并增加了每次檢測(cè)的成本。

 臨床應(yīng)用

急性心肌梗死的早期標(biāo)志物

 嵌合抗體有助于避免HAMA效應(yīng)

在診斷檢測(cè)中解決HAMA問(wèn)題的一個(gè)有力工具是使用嵌合抗體或全人源化抗體。由于對(duì)臨界值要求低，且即使在AMI患者的血漿中cTnI水平也非常低，肌鈣蛋白檢測(cè)特別容易受到HAMA的影響。我們現(xiàn)在已通過(guò)將抗體恒定區(qū)從小鼠來(lái)源序列改為人類來(lái)源序列，將我們的兩種抗心肌肌鈣蛋白I（TnI）抗體轉(zhuǎn)化為嵌合蛋白。嵌合cTnI抗體Rec19C7和Rec16A11由負(fù)責(zé)抗原特異性的原始小鼠來(lái)源可變區(qū)和IgG1同種型的人類來(lái)源恒定區(qū)組成（見(jiàn)圖2）。

![圖2. Hytest嵌合cTnI抗體的示意圖

 同種型轉(zhuǎn)換對(duì)抗體性能無(wú)影響

天然19G7抗體的亞類為IgG2b，而嵌合RecChim19C7的亞類為IgG1。為了確定同種型轉(zhuǎn)換是否有任何影響，我們?cè)趲追N抗體組合中比較了天然和嵌合19C7的性能（見(jiàn)圖3）。結(jié)果證明兩種19C7形式的性能非常相似，觀察到的差異在15%以內(nèi)，這與批間變異系數(shù)一致。

![圖3. 同種型轉(zhuǎn)換對(duì)抗體19C7的性能沒(méi)有影響。

A）檢測(cè)步驟的示意圖。使用天然（左）或嵌合（右）19C7作為捕獲抗體，用Eu3?標(biāo)記的天然抗cTnI（560、MF4、625或560）作為檢測(cè)抗體，肌鈣蛋白復(fù)合物作為抗原。

B）如圖所示，在四種不同的夾心免疫測(cè)定中，將嵌合RecChim19C7（亞類IgG1）的性能與天然19C7（亞類IgG2b）進(jìn)行了比較。

 嵌合抗體可防止體外診斷檢測(cè)中的HAMA效應(yīng)

為驗(yàn)證嵌合抗體對(duì)HAMA效應(yīng)不敏感，使用從AMI患者獲得的含HAMA的血清樣本測(cè)試了嵌合抗體和天然抗體的不同組合的性能。血清樣本中的HAMA濃度范圍為807 ng/ml至6220 ng/ml（見(jiàn)圖4）。含HAMA最高的血清在所有基于天然抗體的組合中都產(chǎn)生了非常高的背景信號(hào)。同時(shí)，含HAMA較低的血清樣本產(chǎn)生了較低但顯著的背景信號(hào)。與此同時(shí)，所有使用嵌合抗體的檢測(cè)在所有測(cè)試的HAMA樣本中要么沒(méi)有背景信號(hào)，要么只有可忽略的背景信號(hào)。

![圖4. 嵌合抗體可減輕HAMA效應(yīng)。

使用三種不同HAMA濃度的血清樣本測(cè)試了嵌合和天然19C7及16A11在HAMA存在下的性能：樣本1中為807 ng/ml，樣本2中為1388 ng/ml，樣本3中為6220 ng/ml。使用不含血清的緩沖液作為對(duì)照。測(cè)試了以下免疫測(cè)定組合：4C2-19C7和4C2-RecChim19C7（A），4C2-16A11和4C2-RecChim16A11（B），以及19C7-16A11和19C7-RecChim16A11（C）。

該測(cè)試結(jié)果清楚地表明，使用嵌合抗體可以防止HAMA效應(yīng)，這使其成為解決這一常見(jiàn)問(wèn)題的潛在新工具。

 訂購(gòu)信息

單克隆抗體

|產(chǎn)品名稱|目錄號(hào)|單克隆抗體|亞類|備注|

|重組嵌合抗cTnI|RC4T21|RecChim19C7|IgG1|酶免疫測(cè)定|

|RecChim16A11|IgG1|酶免疫測(cè)定|

Hytest有限公司

科學(xué)越，服務(wù)體外診斷

品牌是Hytest Hytest北京z代理 Hytest 天津z代理  Hytest深圳z代理  Hytest 上海z代理 Hytest湖北z代理 Hytest湖南z代理  Hytest江蘇z代理  Hytest河南z代理 Hytest河北z代理 Hytest石家莊z代理  Hytest深圳z代理 Hytest廣東z代理

Hytest北京z代理 hytest天津z代理 hytest代理 hytest上海z代理 hytest促 hytest讓利 hytest廣東z代理 hytest深圳z代理hytest福建z代理 hytest河北z代理 hytest河南z代理 hytest山東z代理 hytest山西z代理 hytest內(nèi)蒙古z代理 hytest安徽z代理 hytest江蘇z代理 hytest江西z代理