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氨基酸分析前處理中的小幫手

時(shí)間:2021/8/9閱讀:1172
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                                                     獎(jiǎng)牌榜
                                              2020東京 Olympic




近日讓人熱血的話題莫過(guò)于2020東京 Olympic,北京時(shí)間8月8日,東京 Olympic的全部比賽已宣告結(jié)束,終獎(jiǎng)牌榜也出爐了。本屆比賽,中國(guó)以38金的數(shù)量位于金牌榜第二,太棒了祖國(guó)的運(yùn)動(dòng)健兒們,為你們感到無(wú)比驕傲!


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 Olympic對(duì)于運(yùn)動(dòng)員而言,可謂是十年磨一劍,每一位都要經(jīng)歷日復(fù)一日的刻苦訓(xùn)練。在大量運(yùn)動(dòng)后,運(yùn)動(dòng)員需要及時(shí)補(bǔ)充和平衡在運(yùn)動(dòng)中損失的能量,而氨基酸能為機(jī)體和大腦提供能量,尤其對(duì)于運(yùn)動(dòng)員而言,身體對(duì)于能量的需求遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于常人。今天我們帶來(lái)的小科普就是關(guān)于氨基酸分析。



想要得到滿意的氨基酸分析結(jié)果——樣品前處理是關(guān)鍵!



在食品、動(dòng)物飼料檢測(cè)或者新藥研發(fā)的過(guò)程中,研究員需要對(duì)蛋白質(zhì)樣品中的氨基酸種類(lèi)及含量進(jìn)行測(cè)定;要得到滿意的氨基酸分析結(jié)果,不僅僅要注意樣品的制備,更重要的是樣品的處理。為了讓蛋白質(zhì)樣品能分解成氨基酸便于后續(xù)檢測(cè),一般需要對(duì)樣品進(jìn)行水解處理。水解方法一般有三種,即酸水解,氧化水解和堿水解,其中,為常用的是酸水解法。


酸水解法步驟


1.稱取少量含蛋白質(zhì)的樣品于安瓿管中(切勿粘壁)

2.加入6mol/L HCL,定容,加入phenol

3.液氮冷凍,抽真空,融化安瓿管使其密封

4.3110℃,水解12/24/36/72h

5.水解后,冷卻、混勻、開(kāi)管、過(guò)濾,定容至50ml

6.取0.5ml濾液至濃縮儀中,60℃真空離心干燥,必要時(shí)加少許水,重復(fù)蒸干1-2次

7.加入樣品稀釋液,震蕩混勻,過(guò)濾,供上機(jī)測(cè)定使用


英國(guó)GeneVac——溶劑蒸發(fā)工作站


EZ-2系列、HT系列耐酸型號(hào)則非常適合氨基酸前處理,氨基酸的前處理需要蛋白質(zhì)通常用6N HCl水解,這個(gè)濃度的鹽酸對(duì)傳統(tǒng)的蒸發(fā)系統(tǒng)有很強(qiáng)的腐蝕作用,但是耐酸型號(hào)的GeneVac系統(tǒng)的內(nèi)腔,轉(zhuǎn)子和氣體管路全部帶PTFE涂層,可以輕松處理6N以上鹽酸的濃縮。


其次,批處理量大,1.5ml樣品一次可處理64個(gè),效率高;無(wú)需氮?dú)?,冷阱回收酸蒸汽,防止污染,無(wú)后期成本。


因此,和傳統(tǒng)的氮吹或旋蒸相比,新型GeneVac溶劑蒸發(fā)工作站的優(yōu)勢(shì)是采用抽真空,離心的方式進(jìn)行樣品濃縮,Dri-Pure這樣的關(guān)鍵技術(shù)可以保證樣品安全快速濃縮而且防爆沸,另可使樣品富集,增加樣品回收率。

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高效濃縮、安全防爆沸


耐酸型號(hào)可處理6N 以上鹽酸;

批量處理樣品:一次可以處理幾百個(gè)樣品,加快研發(fā)效率;

Dri-Pure,有效防止樣品暴沸,免于交叉污染;

處理高沸點(diǎn)溶劑:可處理 DMF、DMSO沸點(diǎn)較高的溶劑,處理溶劑的沸點(diǎn)可高達(dá)220℃;

樣品自動(dòng)轉(zhuǎn)移功能:利用SampleGenie™技術(shù)直接干燥后的樣品自動(dòng)轉(zhuǎn)移到樣品瓶中儲(chǔ)存或進(jìn)行后續(xù)上機(jī)分析,無(wú)需二次轉(zhuǎn)移;


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