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中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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percoll分離細(xì)胞的原理

時(shí)間：2022/11/22閱讀：693
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Percoll是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低（<20mosm／kg H2O）, 粘度也很小，可形成高達(dá)41021.3g／ml密度，1653采用預(yù)先形成的密度梯度時(shí)可在低離心力（200～1000g）于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達(dá)到滿意的細(xì)胞分離結(jié)果。由于Percoll擴(kuò)散常數(shù)低，所形成的梯度十分穩(wěn)定。此外，Percoll不穿透生物膜，對(duì)細(xì)胞無毒害，因此廣泛用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞成分、細(xì)菌及病毒，還可將受損細(xì)胞及其碎片與完好的活細(xì)胞分離。

Ficoll常用來分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞。 Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，犌W水性高，平均分子量為400,000，當(dāng)密度為1.2g／ml仍未超出正常生理性滲透壓，也不穿過生物膜。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重大，離心后沉于管底；淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分層液比重，離心后漂浮于分層液的液面上，也可有少部分細(xì)胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細(xì)胞，就可從外周血中分離到單個(gè)核細(xì)胞。

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