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免疫化學發(fā)光法(雙抗體夾心法)測定IgE

時間:2009/9/25閱讀:1195
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免疫化學發(fā)光法雙抗體夾心法測定IgE

 

    [檢測方法免疫化學發(fā)光法雙抗體夾心法

    [方法學原理加入與磁性顆粒共價結合的鼠抗人IgE抗體、待測標本以及吖啶酯標記的羊抗人IgE抗體(1gElite試劑,經過溫育形成固相包被抗體抗原(1gE)—吖啶酯標記抗體復合物,經洗滌后,加人氧化劑(H2O2發(fā)光,其光量子數與IgE濃度呈良好的線性相關。通過光量子數與IgE濃度制作標準曲線,根據樣本產生的光量子數可得出IgE含量。

    [標本準備靜脈血2ml,不抗凝。

    [試劑]

    1.免疫化學發(fā)光法配套試劑及定標液

    2.質控物高、中、低

    [儀器]  ACSl80免疫發(fā)光儀。

    [檢測步驟]

    1.將血清編號后加入反應管內,插入樣品盤;

    2.將試劑放入試劑盤;

    3.將編號及樣品盤號對應輸入電腦,并選擇檢測項目IgE,保存;

    4.按START鍵運行。

    5ACSl80儀將30Il樣本液裝入反應杯中;將100u1 IgE lite試劑與450ulIgE固相試劑加入,并于37環(huán)境中溫浴75min;用去離子水沖洗、分離反應相;加入300tA試劑1與試劑2以啟動光化學反應,反應完成后自動報告結果詳情見各儀器系統(tǒng)操作說明。

  [正常參考值]  0—378Um1

  [注意事項]

  1.試劑取出應充分混勻。

  2.樣本應充分凝固,無纖維、氣泡及其他物質。

    3.樣本檢測應在8h內完成,否則應置28保存。

    448h內不檢測,應將樣本于一20凍存,且只能凍融1次。

    5.若試劑室溫放置超過40h應棄之不用,不使用任何過期試劑。

    [臨床意義]  IgE升高,主要見于過敏性疾病。在感染性疾病中,如寄生蟲感染、支氣管肺曲霉菌病也可升高。

 

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