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elisa試劑盒白介素類干擾因素的研究
點擊次數(shù)：1082 發(fā)布時間：2018-2-28
elisa試劑盒白介素類應(yīng)用價值。
（2）改變酶標抗體：由于RF結(jié)合的是IgG的Fc片段，如果將待酶標的抗體的F，片段酶切去除，僅留下具有特異結(jié)合功能的F（ab’）2部分標記酶，則在測定中即可避免RF的干擾。
（3）標本中RF用變性IgG預(yù)先封閉：將經(jīng)熱變性（63℃，10 min）的動物如兔、羊等的IgG加入到標本稀釋液中，或是將該變性IgG連接至一顆粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然后加入臨床血清標本，反應(yīng)后，再吸出標本進行檢測。此外，在測定特異IgM時，也可使用抗人IgG去除臨床標本中RF和IgG。
（4）測定抗原時，可在標本中加入可使RF降解的還原劑：如2—巰基乙醇。2—巰基乙醇等還原劑可使抗體內(nèi)的巰基裂解，因而可以去除RF的干擾，但只適用于抗原測定。
（5）包被或酶標二抗使用特異的雞抗體IgY：RF不與雞IgY反應(yīng)，如果包被和酶標二抗均為雞IgY抗體，則不受標本中RF的干擾。
2．補體 在固相酶免疫測定中，來自哺乳動物的固相特異抗體和酶標二抗均有激活人補體系統(tǒng)的功能。一方面，固相抗體和酶標二抗可因為其在固相吸附及結(jié)合過程中，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，從而其F，段的補體C1，結(jié)合位點被暴露出來，這樣C1，就成為一個中介物將二者交聯(lián)起來，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。另一方面，固相抗體也會因為活化補體的結(jié)合，封閉抗體的抗原表位結(jié)合能力，而引起假陰性結(jié)果或使定量測定結(jié)果偏低。由補體引起的干擾可通過下述方法避免：
（1）對臨床血清標本加熱滅活補體：采用56~C30 min加熱可使標本中的補體C1。滅活。
（2）包被或酶標二抗使用特異的雞抗體：雞抗體不激活人的補體系統(tǒng)，因此，使用特異的雞抗體，不會出現(xiàn)因補體激活而存在的假陽性和假陰性干擾。
3．異嗜性抗體（heterophilieantibodies） 人類血清中含有抗嚙齒類動物（如鼠、馬、羊等）
的免疫球蛋白（1g）的抗體，即天然的異嗜性抗體。有研究表明，天然的異嗜性抗體（1gG）可分為兩類，一類（85％的假陽性由其引起）可結(jié)合于山羊、小鼠、大鼠、馬和牛IgG的Fab區(qū)域，但不與兔IgG的Fab區(qū)結(jié)合。另一類（15％的假陽性由其引起）可結(jié)合于小鼠、馬、牛和兔IgG的Fc區(qū)表位，但不與山羊和大鼠IgG的Pc區(qū)表位結(jié)合。異嗜性抗體可通過交聯(lián)固相和酶標的單抗或多抗而出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。由異嗜性抗體引起的干擾可通過下述方法避免：
（1）使用特異的兔F（ab’）2。片段作為固相或測定酶標抗體。
（2）在標本或標本稀釋液中加入過量的動物Ig，封閉可能存在的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時無效。
（3）使用靶特異的非Ig親和蛋白（affibody）替代固相或酶標抗體之一。采用噬菌體展示技術(shù)展示來自單個金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）聯(lián)合文庫的人IgA結(jié)合親和蛋白，用于IgA的測定，不受異嗜性抗體的影響。
（4）使用elisa試劑盒白介素類特異的雞抗體作為固相和測定抗體。
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