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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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advancedbiomatrix膠原酶簡(jiǎn)介
膠原酶
粉末
目錄 #5030
該膠原酶產(chǎn)品以 50 mg 包裝大小的凍干無(wú)菌粉末形式提供。它已經(jīng)過(guò)專門測(cè)試并顯示可有效水解膠原蛋白和解離組織。
產(chǎn)品描述
膠原酶由多種酶組成，包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶，旨在有效水解膠原蛋白和解離組織。已經(jīng)評(píng)估了各種膠原酶產(chǎn)品專門用于 Advanced BioMatrix 的膠原蛋白產(chǎn)品。該產(chǎn)品用于提高消化膠原凝膠中分離細(xì)胞的活力和功能。
膠原酶以 50 mg 包裝大小的凍干無(wú)菌粉末形式提供。重構(gòu)后，產(chǎn)品即可使用。
| 參數(shù)、測(cè)試和方法 | 膠原酶 #5030 |
| 形式 | 凍干粉 |
| 包裝尺寸 | 50 毫克 |
| 貯存溫度 | 2-10°C |
| 滅菌方法 | 過(guò)濾 |
| 生物負(fù)載 (cfu) | < 1 |
| 資源 | 溶組織梭菌 |
| 保質(zhì)期 | 自收到之日起至少 6 個(gè)月 |
使用這些建議作為指導(dǎo)來(lái)確定適合您的培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳凝膠解離程序。
在磷酸鹽緩沖鹽水或其他 pH 中性介質(zhì)中重構(gòu)凍干膠原酶粉末（50 毫克）?？梢允褂?1 mg/ml 的典型濃度。
從膠原凝膠中吸出培養(yǎng)基。
用預(yù)熱的 PBS 或其他 pH 中性培養(yǎng)基清洗膠原凝膠 2X，以去除可能抑制膠原降解的培養(yǎng)基。
加入適量的膠原酶溶液（一個(gè)凝膠體積就足夠了）。例如：對(duì)于含有 0.5 ml 凝膠的 24 孔板，添加 0.5 ml 膠原酶溶液。
轉(zhuǎn)移到 37oC 培養(yǎng)箱中 30-60 分鐘。為了促進(jìn)膠原凝膠的更快解離，凝膠和膠原酶溶液可以使用大口徑移液器吸頭上下移液。
如有必要，在 37°C 下再孵育 30-60 分鐘，以完成凝膠的消化。如果需要，每 15 分鐘移取一次凝膠/細(xì)胞混合物。注意：較厚的凝膠或含有較高濃度細(xì)胞的凝膠可能需要更多時(shí)間。
凝膠*消化后，向凝膠/細(xì)胞混合物中加入等體積的*培養(yǎng)基，然后收集細(xì)胞。
沖洗收集任何殘留細(xì)胞的培養(yǎng)容器。
在室溫下以 250 xg 離心細(xì)胞懸液 5 分鐘。
小心吸出上清液，將細(xì)胞沉淀重懸于 0.5 -1 ml 新鮮培養(yǎng)基中。
使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器和臺(tái)盼藍(lán)確定細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力。
