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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中，基因治療被譽(yù)為下一代的醫(yī)療革命。作為基因治療的關(guān)鍵一環(huán)，載體病毒的制備和優(yōu)化是決定基因治療成功與否的關(guān)鍵步驟之一。其中，慢病毒因其能夠穩(wěn)定持久地感染分裂和非分裂細(xì)胞，被廣泛用于基因治療研究中。然而，慢病毒的純化卻是一個充滿挑戰(zhàn)的技術(shù)難題。
目前，慢病毒的純化主要采用超速離心沉淀和離子交換層析的方法。然而，這些方法存在一些問題。例如，超速離心需要高轉(zhuǎn)速設(shè)備，不適于放大生產(chǎn)；而離子交換方法則需要高鹽洗脫，對慢病毒活性損傷較大，收率較低。
慢病毒結(jié)構(gòu)復(fù)雜，對低pH，高鹽，溫度和剪切力非常敏感，現(xiàn)有的純化方法還存在著得率低、成本高、操作繁瑣等問題。Astrea Bioseparations推出了新型納米纖維（AstreAdept™）基質(zhì)LV純化填料LentiHERO，大大提高了感染性LV得率、速度和載量，其可放大到生產(chǎn)規(guī)模。
AstreAdept®新一代納米纖維色譜技術(shù)：
AstreAdept™是一種新型納米纖維材料，不同于傳統(tǒng)凝膠介質(zhì)，它能通過快速的對流模式迅速捕獲大量的目的蛋白，使得工藝運(yùn)行流速不再受限于凝膠孔徑大小。AstreAdept™平均流道直徑860nm，具有優(yōu)異的靶標(biāo)流動特性。
LV 常規(guī)純化工藝搭配新穎的 AstreAdept®
LentiHERO®基于AstreAdept® 納米纖維技術(shù)幫助開發(fā)建立高效純化平臺
新型LV 純化工藝——LentiHERO® Adsorbents
澄清條件 1： 超濾換液體積優(yōu)化
比較1-3倍換液體積對感染滴度（TU），宿主蛋白（HCP）和雙鏈DNA(dsDNA)濃度的影響
Nereus LentiHERO® 純化分析
澄清條件 2 ：離心和超濾（MWCO）
Nereus LentiHERO® 6種澄清條件的LV純化結(jié)果：
澄清條件 3：TFF(100kDa MWCO )和深層過濾對比
4種澄清過濾條件下LV 純化回收率對比：
Nereus LentiHERO® 4種澄清超濾條件LV純化結(jié)果：
LentiHERO® 1 FPLC LV 純化案例分享
LentiHERO® 1 FPLC 純化懸浮體系LV 樣品（TFF超濾換液）
LentiHERO® 1 FPLC可快速獲得高回收率/純度LV
Nereus LentiHERO® 離心管到 LentiHERO® 1 FPLC 純化柱線性放大
懸浮體系生產(chǎn)的LVV工藝放大預(yù)估：
LentiHERO®優(yōu)勢總結(jié)：
載量高、流速快，精簡純化過程
工藝溫和，回收率高
現(xiàn)有生產(chǎn)系統(tǒng)可獲得更高的產(chǎn)量
高效，無需裝柱、拆柱、測柱效
慢病毒的純化技術(shù)是CGT領(lǐng)域中的重要研究方向之一。只有通過不斷的研究和創(chuàng)新，才能夠解決當(dāng)前存在的問題，推動基因與細(xì)胞治療領(lǐng)域的快速發(fā)展。
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| NL100100 | Nereus LentiHERO | 2unitpack | astreabioseparations |
| 3355-00025 | Aminophenylboronate P6XL - 25mL | 25mL | astreabioseparations |
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| 6717 | Aminophenylboronate P6XL Pre-packed Column - 1 x 5 mL | 1 x 5 mL | astreabioseparations |
英國Astrea Bioseparations于1987年成立，公司前身是Affinity Chromoatography Ltd，其從英國劍橋大學(xué)獨(dú)立出來專注于吸附填料的研發(fā)和生產(chǎn)。Astrea Bioseparations 公司兩大核心技術(shù)（產(chǎn)品）Mimetic ligand® 和PuraBead® 是公司產(chǎn)品的基石，迄今為止已有22個上市產(chǎn)品（FDA/EMA） 使用 Astrea Bioseparations公司的產(chǎn)品用于商業(yè)化生產(chǎn)，其中不乏跨國公司和新興生物技術(shù)公司。
