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Targeting Systems—轉(zhuǎn)染、熒光示蹤
Targeting Systems公司是一家依靠美國國立衛(wèi)生研究院(NIH)的小型商業(yè)創(chuàng)新研究基金資助,于1996年5月成立的高科技生物制品企業(yè)。在成立的*年即推出其*產(chǎn)品線—Targefect。Targeting Systems公司從成立zui初的一個員工目前已發(fā)展為擁有多樣化的和強(qiáng)大的知識產(chǎn)權(quán)的生物企業(yè),產(chǎn)品超過100種。憑借其在生物熒光研究領(lǐng)域的優(yōu)勢,Targeting Systems公司致力于新藥研發(fā)、藥物篩選、基因表達(dá)及干細(xì)胞研究與治療的技術(shù)與產(chǎn)品供應(yīng)。同時,Targeting Systems公司也在功能基因組學(xué)上*優(yōu)勢,包括基因表達(dá)調(diào)控,通過胞內(nèi)注入功能性活性蛋白從而改變細(xì)胞功能狀態(tài),以及超敏感的報告基因檢測的研發(fā)。目前公司的主打產(chǎn)品是熒光素酶(Luciferases)檢測試劑盒,可以廣泛應(yīng)用于藥物篩選、基因表達(dá)和干細(xì)胞研究。
Targeting Systems公司的產(chǎn)品的主要應(yīng)用:
一、新藥研發(fā)與藥物篩選
熒光素酶是Targeting Systems公司的主打產(chǎn)品,該系列產(chǎn)品擁有zui強(qiáng)的熒光強(qiáng)度(紅色、藍(lán)色和綠色),產(chǎn)品有著非常寬的光譜選擇,是目前市場上擁有zui大選擇余地的超敏熒光素酶供應(yīng)商,共有7種顏色的光譜,比市場上常規(guī)的Photinus和Renilla熒光素酶的熒光強(qiáng)6 - 1000倍。產(chǎn)品包括Gaussia熒光素酶,Cypridina熒光素酶,綠/藍(lán)分泌型Renilla熒光素酶,紅色Luciola Italica熒光素酶以及ans熒光素酶檢測試劑??梢淮涡詰?yīng)用單/雙或3個熒光素酶進(jìn)行研究。
二、基因轉(zhuǎn)染—Targefect產(chǎn)品線
Targeting Systems公司*的Virofect轉(zhuǎn)染技術(shù)(一種腺病毒來源的強(qiáng)化配方,可直接將目的基因?qū)爰?xì)胞核,zui大程度增強(qiáng)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率)可實現(xiàn)轉(zhuǎn)染以及難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,包括多種原代培養(yǎng)細(xì)胞,轉(zhuǎn)染效果甚至優(yōu)于電轉(zhuǎn)染。還提供根據(jù)特定細(xì)胞設(shè)計的轉(zhuǎn)染試劑及轉(zhuǎn)染實驗方案,以提高特定難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。多種因素促成了Targefect產(chǎn)品線的轉(zhuǎn)染與*優(yōu)勢,包括Tarefect F-2 試劑,多肽增強(qiáng)子,Virofect轉(zhuǎn)染技術(shù)等。這些*優(yōu)勢包括
1、使用*配方的試劑完成基因直接入核核;
2、使用簡單而易于操作的脂質(zhì)配方完成部分難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)染;
3、使用基于腺病毒的增強(qiáng)試劑配方,利用細(xì)胞表面的腺病毒受體進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染,這種方法可得到的基因轉(zhuǎn)染以及增加所轉(zhuǎn)基因的表達(dá)效率;
4、產(chǎn)品包括適用于大多數(shù)細(xì)胞株的細(xì)胞特異的轉(zhuǎn)染試劑與方案。
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Human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) |
| HEK-293 cells |
| Human hepatocytes |
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Even Large DNA loads Vascularare efficiently delivered. Delivery of 170kD BACs in CV-1 cells |
| Smooth muscle cells |
| Macrophages (Raw 267.4 cells) |
三、腫瘤成像與細(xì)胞示蹤
Targeting Systems公司利用慢病毒-熒光素酶結(jié)合技術(shù) (LentiGlo TM)可表達(dá)zui強(qiáng)的熒光,實現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(幾乎100%的轉(zhuǎn)染效率),是體內(nèi)生物成像(培養(yǎng)細(xì)胞或活體動物)的理想產(chǎn)品。LentiPower™試劑盒可在研究人員實驗室快速得包裝自己的熒光表達(dá)慢病毒。Targeting Systems公司的腫瘤成像與細(xì)胞示蹤產(chǎn)品還具有以下優(yōu)勢:
快速制備穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞;
憑借特定的分泌型熒光素酶及強(qiáng)熒光蛋白可在體外培養(yǎng)細(xì)胞或體內(nèi)研究基因表達(dá);
具有zui高的轉(zhuǎn)染效率,可穩(wěn)定轉(zhuǎn)染多數(shù)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞,如干細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞;
利用多種顏色(光譜)的熒光素酶及報告子可在同一組細(xì)胞中分析多個分子通路;
可在研究人員自己的啟動子或目的時間點研究基因表達(dá);
使用安全的自失活載體,可在研究干細(xì)胞或體內(nèi)腫瘤生長和存活時不損傷細(xì)胞。
四、基因沉默(konckdown)
利用Targeting Systems公司的Targefect siRNA試劑盒可轉(zhuǎn)入 siRNA /microRNA ,憑借基于Gaussia熒光素酶的pSiiScreen系統(tǒng),可在體內(nèi)或體外篩選。是實時高通量篩選siRNAs的理想工具。
五、干細(xì)胞研究
胚胎干細(xì)胞及間充質(zhì)干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染試劑,利用蛋白輸送系統(tǒng)可定向干細(xì)胞分化類型,而LentiGlo可檢測細(xì)胞的生長和存活狀態(tài)。
轉(zhuǎn)染試劑:可將功能性活性蛋白導(dǎo)入各種原代人類干細(xì)胞的胞內(nèi)或核內(nèi),通過導(dǎo)入特定的轉(zhuǎn)錄因子監(jiān)測體內(nèi)干細(xì)胞的分化狀態(tài)。
StemTrack™:用于體內(nèi)外無損傷監(jiān)測干細(xì)胞存活、生長于分化。
Profect蛋白輸送試劑(Protein delivery Reagents):
LentiGlo™:是Targeting Systems公司提供的*慢病毒-熒光素酶產(chǎn)品,可穩(wěn)定轉(zhuǎn)染人類干細(xì)胞,使之成為與熒光蛋白一起高共表達(dá)特定熒光素酶的細(xì)胞類型。
六、蛋白導(dǎo)入系統(tǒng)
Targeting Systems公司的蛋白導(dǎo)入系統(tǒng)可實現(xiàn)胞內(nèi)或核內(nèi)導(dǎo)入功能性蛋白、多肽或抗體,可將蛋白導(dǎo)入巨噬細(xì)胞,進(jìn)而研究微生物導(dǎo)致的疾病的發(fā)病機(jī)理。具有如下優(yōu)勢優(yōu)勢:
可為包括人類干細(xì)胞在內(nèi)的大多數(shù)細(xì)胞株導(dǎo)入多種蛋白;
導(dǎo)入蛋白具有高活性;
可導(dǎo)入功能性抗體;
可導(dǎo)入功能性酶(如CRE重組酶、caspase,β-半乳糖苷酶,熒光素酶等)進(jìn)行多方面的細(xì)胞學(xué)研究;
可將功能性蛋白導(dǎo)入分化的細(xì)胞;
可用于鑒定微生物(細(xì)菌或寄生蟲)發(fā)病機(jī)理的毒性因素,病理機(jī)制及鑒定特定的藥物靶點;
可實現(xiàn)多個蛋白的同時共導(dǎo)入,導(dǎo)入效率高,可實現(xiàn)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的蛋白導(dǎo)入。
七、LiveResponse™
該產(chǎn)品是Targeting Systems公司的產(chǎn)品,可使用5種分泌型的強(qiáng)熒光報告子—Gaussia熒光素酶(482 nm), Cypridina熒光素酶(463 nm), Blue-shifted Renilla熒光素酶(467 nm), Green Renilla熒光素酶(527 nm)及Red Italica firefly熒光素酶(613 nm)—在同一群細(xì)胞分析4種不同啟動子活性,在活性中檢測 NFKB 、CRE構(gòu)件、 GPVR譜及凋亡。該產(chǎn)品還具有以下優(yōu)勢:
高的靈敏度及快速檢測功能
在同一群細(xì)胞中可分析3條或更多哦分子通路,而且不損傷細(xì)胞的前提下進(jìn)行實時研究。
通過選擇不同發(fā)射波長的熒光素酶,可以實現(xiàn)一次熒光素酶試劑導(dǎo)入中研究多個熒光素酶報告子。
高熒光強(qiáng)度及穩(wěn)定性使這些新穎的熒光素酶報告子非常適合于高通量篩選應(yīng)用
與其他商業(yè)熒光素酶檢測系統(tǒng)相比具有高性價比
體內(nèi)無損傷應(yīng)用。
八、蛋白表達(dá)系統(tǒng)
Targefect-293/Targefect-293F是Targeting Systems公司高水平的蛋白表達(dá)體系,其*的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染配方可實現(xiàn)293細(xì)胞和CHO細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,操作方法簡便。