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BY-3852R腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體
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BY-3852RTNFRSF19/TROY 腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體
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加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔 中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照) ↓ 于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml, 37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測(cè)抗體的存在。 4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸): 0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml??寺』螖?shù)的多少由分泌能力強(qiáng)弱和抗原的免疫性強(qiáng)弱而決定。一般說(shuō),免疫性強(qiáng)的抗原克隆次數(shù)可少一些,但至少要3~5次克隆才能穩(wěn)定。克隆化的方法很多,包括有限稀釋法、顯微操作法、軟瓊脂平板法及熒光激活分離法等。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。


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