氣相色譜儀的內(nèi)標(biāo)法在氣相色譜定量分析中是一種重要的技術(shù)。使用內(nèi)標(biāo)法時,在樣品中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),它可被色譜拄所分離,又不受試樣中其它組分峰的干擾,只要測定內(nèi)標(biāo)物和待測組分的峰面積與相對響應(yīng)值,即可求出待測組分在樣品中的百分含量。采用內(nèi)標(biāo)法定量時,內(nèi)標(biāo)物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說,內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個能得到純樣的己知化合物,這樣它能以、已知的量加到樣品中去,它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學(xué)性質(zhì)(如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應(yīng)特征,建議是被分析物質(zhì)的一個同系物。當(dāng)然,在色譜分析條什下,內(nèi)標(biāo)物必須能與樣品中各組分充分分離。需要指出的是,在少數(shù)情況下,分析人員可能比較關(guān)心化臺物在一個復(fù)雜過程中所得到的回收率,此時,他可以使用一種在這種過程中很容易被回收的化臺物作內(nèi)標(biāo),來測定感興趣化合物的百分回收率,而不必遵循以上所說的選擇原則。
在使用內(nèi)標(biāo)法定量時,有哪些因素會影響內(nèi)標(biāo)和被測組分的峰高或峰面積的比值?影響內(nèi)標(biāo)和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學(xué)方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。由化學(xué)方面的原因產(chǎn)生的面積比的變化常常在分析重復(fù)樣品時出現(xiàn)?;瘜W(xué)方面的因素包括:內(nèi)標(biāo)物在樣品里混合不好;內(nèi)標(biāo)物和樣品組分之間發(fā)生反應(yīng);內(nèi)標(biāo)物純度可變等。
外標(biāo)法是用一種濃度的對照品溶液對比測定樣品溶液中i組分的含量。將對照品溶液與樣品溶液在相同條件下多次進樣,測得峰面積的平均值,用下式計算樣品中i組分的量: w=a(w)/(a)式中w與a分別代表在樣品溶液進樣體積中所含i組分的重量及相應(yīng)的峰面積。(w)及(a)分別代表在對照品溶液進樣體積中含純品i組分的重量及相應(yīng)峰面積。外標(biāo)法方法簡便,不需用校正因子,不論樣品中其他組分是否出峰,均可對待測組分定量。但此法的性受進樣重復(fù)性和實驗條件穩(wěn)定性的影響。此外,為了降低外標(biāo)一點法的實驗誤差,應(yīng)盡量使配制的對照品溶液的濃度與樣品中組分的濃度相近。
外標(biāo)法的色譜分析中的一種定量方法,它不是把標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加入到被測樣品中,而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定,把得到的色譜峰面積與被測組分的色譜峰面積進行比較求得被測組分的含量。外標(biāo)物與被測組分同為一種物質(zhì)但要求它有一定的純度,分析時外標(biāo)物的濃度應(yīng)與被測物濃度相接近,以利于定量分析的性。
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