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2012-5-17 閱讀(2148)
11. 我建議1 先把培養(yǎng)箱*消毒.具體方法也是用75%的酒精好好清洗培養(yǎng)箱.2,操作時(shí)嚴(yán)格按照無菌操作的原則3 我認(rèn)為雙抗的更換問題倒是不大,除非你正在使用的是污染的抗生素.4 盡量減少觀看細(xì)胞的次數(shù)及時(shí)間.
12. 我們實(shí)驗(yàn)室清潔培養(yǎng)箱的方法：用洗衣粉或洗潔精洗一遍——清水沖凈——84消毒液洗——清水沖凈——75％酒精擦洗一遍
13. 這是我們實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的培養(yǎng)箱消毒方法（一般一個(gè)月一次），希望對(duì)你會(huì)有用
14. 首先把培養(yǎng)箱里的東西全部取出，放盡培養(yǎng)箱里的三蒸水；反復(fù)用三蒸水沖洗培養(yǎng)箱，然后用75%酒精擦3遍，之后再用三蒸水擦3遍；培養(yǎng)箱里的架子先用自來水反復(fù)沖洗，然后用蒸餾水、三蒸水、75%酒精各擦3次，于紫外下照射消毒1 h左右；zui后將三蒸水（里面應(yīng)加少許染料）加入培養(yǎng)箱，將消毒好的架子放入即
15. 培養(yǎng)箱應(yīng)放置無菌室,水中應(yīng)加適量的疊氮鈉（防腐）或者硫酸銅,注意空氣消毒.
16. 消毒培養(yǎng)箱的常用方法有兩種：把細(xì)胞移出，記住擰緊瓶蓋，通常放在超凈臺(tái)內(nèi)，室溫一兩個(gè)小時(shí)，問題不大。如培養(yǎng)室有空調(diào)，也可將空調(diào)打開。然后先用75%酒精棉球擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁，注意不要漏掉任何一個(gè)角落。擦拭兩遍后用一蒸水或二蒸水清洗內(nèi)壁，可多清洗幾遍。zui后用消過毒的棉球或75%酒精棉球把內(nèi)壁再擦拭一遍即可。整個(gè)操作沒有必要在無菌條件下。zui后可在培養(yǎng)箱的水里加上亞甲基藍(lán)，混勻即可。亞甲基藍(lán)溶液可起到一定的抑菌殺菌作用。待培養(yǎng)箱內(nèi)酒精幾乎揮發(fā)完時(shí)，將細(xì)胞放入培養(yǎng)箱中。還有一種辦法就是直接用蒸餾水清洗完，然后再用紫外燈照（是那種培養(yǎng)箱里就帶有紫外燈的，就方便多了。）通常培養(yǎng)箱是需要定期清洗的，我們室是1-2月清洗一次，當(dāng)然這要根據(jù)細(xì)胞養(yǎng)的多少和培養(yǎng)箱使用的頻繁程度來決定的。
17. 我們實(shí)驗(yàn)室液發(fā)生過類似事件，我把我們處理過程告訴你，希望對(duì)你有幫助：首先消毒培養(yǎng)箱，如果你們有兩個(gè)或以上培養(yǎng)箱就好辦了，如果只有一個(gè)且還有很多其他細(xì)胞就麻煩點(diǎn)。只能暫時(shí)的放在超凈臺(tái)上。具體如下，中午將空調(diào)溫度打到zui高（也只有31度），超凈臺(tái)開紫外。下午早點(diǎn)來關(guān)紫外，將細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋蓋緊，轉(zhuǎn)到超凈臺(tái)內(nèi)，用75％酒精擦洗培養(yǎng)箱，再用無臭氧型可移動(dòng)的紫外等照射半小時(shí)，然后將細(xì)胞放回，松開蓋口即可（切記CO2瓶子閥門要關(guān)緊啊，不然氣全跑光了）。一般實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)了霉菌的話，肯定要全部消毒。再消毒實(shí)驗(yàn)室，先把室內(nèi)空調(diào)和消毒柜過濾網(wǎng)都拆下清洗，在錐形瓶?jī)?nèi)加點(diǎn)高錳酸鉀，放在實(shí)驗(yàn)室地上，然后倒入甲醛，立馬關(guān)門走人就可以了。2天后再開門裝好東西，和往常一樣開始工作了。由于2天不能做事，個(gè)人細(xì)胞要先計(jì)劃好，大家都可以休息兩天。
18. 我們實(shí)驗(yàn)室是將細(xì)胞全部取出，酒精擦洗培養(yǎng)相，然后用紫外線照射4小時(shí)以上，污染細(xì)胞全部丟掉。還有就是培養(yǎng)室也采用紫外線消毒
19. 我也碰過這個(gè)情況，是自己的基礎(chǔ)培養(yǎng)基污染了，光鏡下面可以看見瓶底有細(xì)細(xì)的黑色小顆粒，但具體原因不詳。處理方法：1、被污染的細(xì)胞全部照過紫外線2小時(shí)以上后扔掉；2、同一批的培養(yǎng)基、使用的細(xì)胞清洗液等等全部重新濾過消毒（有點(diǎn)舍不得全部扔掉，就嘗試了一下，結(jié)果證明是可以的）；3、打開培養(yǎng)箱，用75%酒精擦洗，然后用新潔爾滅擦洗（此步驟我們重復(fù)了2次，隔天），用紫外照射4小時(shí)以上；4、清掃培養(yǎng)室，紫外照4小時(shí)以上，重復(fù)一次；后來就沒有啦。：）如果污染嚴(yán)重的話，那就要重復(fù)重復(fù)再重復(fù)了。
20. 偶也在年前遇到兩次大爆發(fā)，先是真菌后是細(xì)菌。搞得我對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)都快失去信心了，我養(yǎng)細(xì)胞都一年半了，平時(shí)細(xì)胞沒什么，感覺養(yǎng)細(xì)胞是很簡(jiǎn)單的事，可是當(dāng)污染大爆發(fā)時(shí)真的有招架不住的感覺。記得當(dāng)時(shí)丟掉了幾乎所有的細(xì)胞，近一百瓶，就只剩下保種的三兩瓶，寒?。?！至于處理方法，也就是乳酸熏蒸（記得把培養(yǎng)箱及超凈臺(tái)打開）之后一周關(guān)門關(guān)窗，不再進(jìn)培養(yǎng)室，一周后75%酒精做*滅菌，也就是用酒精搽培養(yǎng)箱及培養(yǎng)室里的所有平面，甚至包括地面。到現(xiàn)在有四個(gè)月了，偶的細(xì)胞一直很好。建議不要驚慌，所謂兵來將擋，水來土掩。呵呵呵，一切會(huì)好起來的。
