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lipo2000轉(zhuǎn)染試劑使用問(wèn)題解答
閱讀：483 發(fā)布時(shí)間：2015-6-17| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 14KB |
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| 資料類型 | WORD 文檔 | 瀏覽次數(shù) | 483次 |
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lipo2000是各大實(shí)驗(yàn)室，科學(xué)院，技術(shù)實(shí)驗(yàn)室zui常用的轉(zhuǎn)染試劑，小小的試劑，價(jià)格不菲，經(jīng)常聽(tīng)到客戶說(shuō)嚴(yán)格按照說(shuō)明書來(lái)操作，還會(huì)出現(xiàn)這樣或者那樣的問(wèn)題?？蛻艚?jīng)常抱怨東西貴，還做不出好效果。
1. Lipo2000的保存：4℃保存和運(yùn)輸
2. Lipo2000的活性：由于Lipo2000是生物蛋白，在4℃保存和運(yùn)輸，所以就算是同
一個(gè)批號(hào)的Lipo2000，只有在剛出廠分裝時(shí)活性才是相同的。經(jīng)過(guò)供應(yīng)商的保存、
運(yùn)輸（運(yùn)輸?shù)臏囟瓤刂聘鞑幌嗤?，其活性將有?xì)微的變化。
3. Lipo2000的優(yōu)化：
3.1 由于每一管Lipo2000的活性都不太相同，其實(shí)就算是同一管，使用的時(shí)間長(zhǎng)了，后期的活性跟剛開(kāi)始用時(shí)也不太一樣，所以在拿到一管新的Lipo2000時(shí)，一定要做一下活性優(yōu)化；
3.3 如果一直使用Lipo2000做實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化的步驟可以簡(jiǎn)化：
假設(shè)之前轉(zhuǎn)化時(shí)每孔一直用4ul Lipo2000，那么優(yōu)化的步驟可以簡(jiǎn)化為只用5個(gè)孔，每個(gè)孔中Lipo2000用量分別為3ul, 3.5ul, 4ul, 4.5ul, 5ul，其他條件不變，看那個(gè)Lipo2000的用量結(jié)果，接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)就用優(yōu)化的用量。
4. Lipo2000的使用：
4.1 使用前將整管的Lipo2000混勻，分裝，分成100ul/管；
4.2 實(shí)驗(yàn)前，將分裝好的100ul Lipo2000和質(zhì)粒DNA（或RNA）放到實(shí)驗(yàn)臺(tái)上室溫平衡，不需要冰上保存；
4.3 將Opti-MEM培養(yǎng)基放到水浴鍋中37℃平衡；
4.4 按照說(shuō)明書進(jìn)行轉(zhuǎn)染，注意控制好每一步操作的時(shí)間。
5. 切記并不是Lipo2000的用量越多越好，實(shí)際上，Lipo2000加多了，毒性會(huì)增加，細(xì)胞會(huì)死亡，轉(zhuǎn)化效率會(huì)大幅降低。