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上海恒遠(yuǎn)通用性免疫組化試劑盒使用說(shuō)明書

閱讀:317          發(fā)布時(shí)間:2013-5-14
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                           Histostain™ - Plus Kits

 

                          免疫組化染色試劑盒

 

簡(jiǎn)介

 

     上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供的美國(guó) ZYMED 公司 SP 系列試劑盒,全稱為過(guò)氧化物酶

 

 標(biāo)記的鏈霉卵白素(Streptavidin/ Peroxidase)染色試劑盒。該方法由美國(guó)ZYMED 公司于 1986 年

 

 首建。由于鏈霉卵白素的分子量是 60kDa,有四個(gè)亞基可和生物素結(jié)合,等電點(diǎn)為 6.5,所以該方

 

 法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、背景清晰、成本低廉的優(yōu)點(diǎn),是理想的免疫組化染色方法。

 

試劑盒內(nèi)容 

 

 試劑      (無(wú)色液體):3% H O 去離子水                                  3ml、6ml 或 18ml

                        2 2

 

 試劑 A   (藍(lán)色液體):封閉用正常山羊血清工作液                                  3ml、6ml 或 18ml

 

 試劑 B   (黃色液體):生物素化二抗工作液(IgG / Bio )                         3ml、6ml 或 18ml

 

                    SP-9000:生物素標(biāo)記山羊抗兔、大鼠、小鼠和豚鼠IgG

 

                    SP-9001:生物素標(biāo)記山羊抗兔IgG

 

                    SP-9002:生物素標(biāo)記山羊抗小鼠IgG

 

 試劑 C   (橙色液體):辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液(S-A/HRP)                        3ml、6ml 或 18ml

 

標(biāo)本染色 

 

 1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水。                           7 、滴加試劑B    (黃色液體),室溫或37℃

 

 2 、3% H O 去離子水(無(wú)色液體)孵育 5~10                孵育 10~15 分鐘。

        2 2

 

    分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性。                     8 、PBS 沖洗,3 分鐘×3 次。

 

 3、蒸餾水沖洗,PBS 浸泡 5 分鐘(如需采                  9 、滴加試劑 C   (橙色液體),室溫或37℃

 

    用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。                         孵育 10~15 分鐘。

 

 4 、滴加試劑A  (藍(lán)色液體)室溫孵育10~15              10、PBS 沖洗,3 分鐘×3 次。

 

    分鐘,傾去,勿洗。                           11、顯色劑顯色(DAB 或 AEC )。

 

 5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2~3                 12、自來(lái)水充分沖洗。

 

    小時(shí)或 4 ℃過(guò)夜。                          13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。

 

 6、PBS 沖洗,3 分鐘×3 次。                     14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/p>

 

保存方法 

 

 2~8 ℃暗處保存。

 

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