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產(chǎn)品簡介
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詳細介紹
elisa kit elisa原理 人絲裂原活化蛋白激酶激酶6試劑盒
產(chǎn)品名稱：人絲裂原活化蛋白激酶激酶6試劑盒
英文名稱：Human mitogen activated protein kinase kinase 6,MKK6 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
經(jīng)營種類：進口分裝和原裝、國產(chǎn)
主要作用：科研
保存條件：2-8℃
各種種屬：人，小鼠，大鼠，豚鼠，豬，犬，兔，牛，羊，猴，兔，馬等動物種屬。
待檢樣本：體液，血清，血漿，細胞培養(yǎng)上清液，尿液，組織勻漿,心房水標本等等。
ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求:
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右 （2000-3000轉(zhuǎn)/分）去除顆粒。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清 。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
間接法是檢測抗體zui常用的方法，其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：
（1）將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
（2）加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合，在洗滌過程中被洗去。
?。?）加酶標抗抗體：與固相復合物中的抗體結(jié)合，從而使該抗體問接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體，可用酶標羊抗人IgG抗體。
?。?）加底物顯色：顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。
Elisa間接法、競爭法、捕獲法，捕獲法測IgM抗體
血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在，后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗體多用捕獲法，先將所有血清IgM（包括特異性IgM和非特異性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再測定特異性IgM。操作步驟如下：
（1）將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。
?。?）加入稀釋的血清標本：保溫反應后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。
?。?）加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。
?。?）加入針對特異性的酶標抗體：使之與結(jié)合在固相上的抗原反應結(jié)合。洗滌。
?。?）加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在，是為陽性反應。
上海恒遠生物科技有限公司主要供應進口／國產(chǎn)ELISA試劑盒、細胞、血清、抗體、金標試劑盒、生物試劑、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品，是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和銷售的綜合性生物科學公司,產(chǎn)品國內(nèi)大部分地區(qū)。公司專注于高品質(zhì)ELISA試劑盒的整合和研發(fā)，打造國內(nèi)，*的ELISA試劑盒，希望恒遠公司的ELISA試劑盒能為國家科研做出的貢獻。
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