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haemtech骨鈣素

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haemtech骨鈣素

Osteocalcin

骨鈣素

牛骨鈣蛋白
的氨基酸序列牛骨骨鈣素的氨基酸序列。γ-羧基谷氨酸殘基的位置用γ表示。

 

 

HOC-0302 人骨骨鈣素

 

尺寸

20微克

公式

20mM Tris,150mM NaCl,pH 7.4

 

存儲(chǔ)

-80℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

 

活動(dòng)決定

N / A

保質(zhì)期(妥善保存)

12個(gè)月

 

 

BOC-3020 牛骨骨鈣素

尺寸

100微克

公式

50%甘油/ H 2 O(v / v)

 

存儲(chǔ)

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

 

活動(dòng)決定

N / A

保質(zhì)期(妥善保存)

12個(gè)月

 

 

 

骨鈣蛋白,也稱為骨 - 蛋白 - 蛋白質(zhì)(BGP),是由成骨細(xì)胞產(chǎn)生的單鏈(Mr = 5800)維生素K依賴性蛋白質(zhì),在骨中發(fā)現(xiàn)高濃度(1-4)。通過維生素K依賴性羧化酶的翻譯后修飾在位置17,21和24產(chǎn)生三個(gè)g-羧基谷氨酸殘基。成熟蛋白含有49個(gè)氨基酸和一個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵,將Cys23連接到Cys29。二級(jí)結(jié)構(gòu)高度依賴鈣,在鈣存在下含有14%α-螺旋,20%β-折疊和67%隨機(jī)形式,1%α-螺旋,20%β-折疊和79%隨機(jī)形式?jīng)]有鈣(4)。

BGP在鈣離子存在下與磷脂囊泡結(jié)合(Kd = 6×10 -6 M)(5)。BGP還與羥基磷灰石結(jié)合,是羥基磷灰石晶種生長(zhǎng)的有效抑制劑,表明在骨礦化中具有調(diào)節(jié)作用(6)。雖然BGP在體內(nèi)的基本作用仍然難以捉摸,但體外實(shí)驗(yàn)表明骨吸收和骨形成都有作用。已經(jīng)顯示BGP在體外巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收系統(tǒng)中起化學(xué)引誘劑的作用。BGP的血清濃度與骨形成率有關(guān),BGP水平目前用于骨質(zhì)疏松癥和其他代謝性骨病狀態(tài)的研究評(píng)估(7)。

骨鈣蛋白通常由Price等人描述的牛骨制備。(1)。這涉及EDTA中的脫礦質(zhì),尺寸排阻和離子交換色譜。純化的蛋白質(zhì)以50%(體積/體積)甘油/0.01M Tris,0.075M NaCl,pH 7.4供應(yīng),并應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃。使用免疫親和層析從酸脫礦質(zhì)骨的提取物制備人骨鈣蛋白。人蛋白質(zhì)以0.02M Tris,0.15M NaCl,2mM CaCl2,pH7.4提供,應(yīng)儲(chǔ)存在-80℃。通過SDS-PAGE確定純度。

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

牛骨鈣素,每道1微克

緩沖

MES

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(188 kDa),磷酸化酶B(98 kDa),BSA(62 kDa),谷氨酸脫氫酶(49 kDa),酒精脫氫酶(38 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(17 kDa),溶菌酶(14 kDa),抑肽酶(6kDa),胰島素,B鏈(3kDa)。

 

 

本土化

骨,血漿

行動(dòng)方式

未知

分子量

5,800(1)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 13.3(7)(計(jì)算)

 

等電點(diǎn)

4.0-4.5(8)

結(jié)構(gòu)體

單鏈,一個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵,Cys 23-29。

碳水化合物百分比

0%

翻譯后修改

三個(gè)玻璃殘留物,17,21,24

 

 

參考:

  1. Price,PA,et al。,in Bone and Mineral Research,Vol。1,編輯。Peck,W.,pp.157-190,Ansterdam:Escerpta Medica(1983)。
  2. Hauschka,PV,et al。,Proc。國(guó)家科??茖W(xué)院。Sci。,USA,73,1447(1975)。
  3. Gundberg,CM等人,Methods Enzymol。,107,516(1984)。
  4. Delmas,PD等,Biochemistry,23,4720(1984)。
  5. Gendreau,MA,et al。,J.Biol。Chem。,264,6972(1989)。
  6. Romberg,RW等人,Biochemistry,25,1176(1986)。
  7. Tracy,RP,et al。,J。Bone Min。Res。,5,451(1990)。

 

 

 

 

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