JETPEI-巨噬細胞轉(zhuǎn)染說明書

時間：2021-6-3閱讀：5519

polyplus-transfection JETPEI-巨噬細胞轉(zhuǎn)染說明書

適用于原代巨噬細胞、神經(jīng)膠質(zhì)和樹突細胞

JETPEI ® -巨噬細胞

原代巨噬細胞、神經(jīng)膠質(zhì)和樹突細胞的高效轉(zhuǎn)染
易于使用的協(xié)議
與血清和抗生素兼容

概述

規(guī)格

試劑	JETPEI ® -巨噬細胞
分子交付	脫氧核糖核酸
應(yīng)用	原代巨噬細胞、神經(jīng)膠質(zhì)和樹突細胞的 DNA 轉(zhuǎn)染
細胞類型	原代巨噬細胞、膠質(zhì)細胞和樹突細胞
轉(zhuǎn)染次數(shù)	0.5 ml jetPEI ® -巨噬細胞轉(zhuǎn)染試劑足以在 24 孔板中進行多達 500 次轉(zhuǎn)染或在 60 毫米培養(yǎng)皿中進行 160 次轉(zhuǎn)染
貯存	5°C ± 3°C，長達 12 個月
提供	150 毫米氯化鈉

概括

jetPEI®-巨噬細胞轉(zhuǎn)染被認為難以轉(zhuǎn)染的原代巨噬細胞、神經(jīng)膠質(zhì)和樹突細胞。它含有甘露糖偶聯(lián)的線性聚乙烯亞胺，可與表達甘露糖特異性膜受體的細胞（如巨噬細胞）結(jié)合。

jetPEI®-Macrophage 也是轉(zhuǎn)染細胞系（如 RAW 264.7）的試劑。

jetPEI®-Macrophage 是一種含甘露糖的線性聚乙烯亞胺，旨在增強在細胞膜上表達甘露糖受體的細胞的轉(zhuǎn)染。細胞靶向是甘露糖殘基與特定細胞表面受體結(jié)合導(dǎo)致 DNA 復(fù)合物內(nèi)化的結(jié)果。

訂購信息

參考編號	試劑量	氯化鈉的量
103-05N	0.5 毫升	50毫升

0.5 ml jetPEI®-巨噬細胞轉(zhuǎn)染試劑足以在 24 孔板中進行多達 500 次轉(zhuǎn)染。

描述

原代人巨噬細胞的轉(zhuǎn)染

JETPEI ® -巨噬細胞使巨噬細胞的轉(zhuǎn)染成功從熟化7天在GM-CSF（圖1）的存在的單核細胞衍生的。

jet-PEI-巨噬細胞-fig1-vc

圖 1：用jetPEI ® -巨噬細胞轉(zhuǎn)染人類巨噬細胞。使用jetPEI ® -巨噬細胞轉(zhuǎn)染后表達β-半乳糖苷酶的人巨噬細胞。

與多功能 jetPEI ®相比，轉(zhuǎn)染效率更高

當(dāng)用jetPEI ® -巨噬細胞轉(zhuǎn)染時，原代人類巨噬細胞和鼠 RAW 264.7 細胞表達顯著更高的蛋白質(zhì)水平（圖 2）。

jetPEI-巨噬細胞 - 比較 jetPEI

圖 2：jetPEI ® -Macrophage 與 jetPEI ®在 24 孔板中對原代人巨噬細胞和鼠 RAW 264.7 細胞的效率比較。在存在 100 U/ml GM-CSF 和 10% 血清的情況下，使用 1 µg pCMVLuc 和 2 µl 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染原代人巨噬細胞。使用 2 µg pCMVLuc 和 6.4 µl 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染鼠 RAW 264.7 細胞。轉(zhuǎn)染后24小時測量熒光素酶活性。

易于使用的協(xié)議

所述JETPEI ®細胞-巨噬協(xié)議是那么簡單，JETPEI ®之一：混合與試劑反應(yīng)以形成復(fù)合物，并簡單地將混合物加入到細胞中的DNA。JETPEI ® -巨噬細胞是與血清和抗生素兼容，因此消除了對媒體改變的需要。在轉(zhuǎn)染后 24 小時至 72 小時確定蛋白質(zhì)表達。

應(yīng)用

JETPEI ® -巨噬細胞非常適合于質(zhì)粒遞送（DNA，shRNA或miRNA的），以表達細胞特異性甘露糖的膜受體，如原發(fā)性巨噬細胞，神經(jīng)膠質(zhì)和樹突狀細胞。

每一批jetPEI ® -巨噬細胞都在轉(zhuǎn)染試驗中進行測試。通常，在CMV啟動子控制下的螢火蟲熒光素酶基因的轉(zhuǎn)染產(chǎn)生10 9 RLU（相對光單位）/mg蛋白質(zhì)。每個批次的值都在分析證書上注明。

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