欧美国产日韩在线免费观看-欧美日韩成人激情一区二区-欧美久久综合一区二区-亚洲av寂寞少妇久久

上海研謹(jǐn)生物科技有限公司

蔗糖合成酶(Sucrose synthase,SS)試劑盒說(shuō)明書微量法

時(shí)間:2024-5-29閱讀:510
分享:

蔗糖合成酶(Sucrose synthaseSS)試劑盒說(shuō)明書

微量法

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義

蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向庫(kù)"器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。SSEC 2.4.1.13)催化植物體內(nèi)游離果糖和葡萄糖合成蔗糖。

測(cè)定原理

SS催化游離果糖與葡萄糖供體UDPG反應(yīng)生成蔗糖,蔗糖與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰

試劑的組成和配制

提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 2.5mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:1000μg/mL 蔗糖溶液 10mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 2mL×1 瓶,4℃保存

試劑四:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;

試劑五:液體 6mL×1 瓶,4℃保存;

樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至480nm,蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測(cè)定,(在EP管中依次加入下列試劑):

試劑名稱(μL)  

測(cè)定管  

對(duì)照管  

標(biāo)準(zhǔn)管  

空白管

樣本  

10

10



蒸餾水  


45  

45  

55

試劑二



10


試劑一

45




混勻,25℃準(zhǔn)確水浴 10min

試劑三  

15  

15  

15  

15

沸水浴中煮沸 10min 左右(蓋緊,以防止水分散失),冷卻

試劑四  

210  

210  

210  

210

試劑五  

60  

60  

60  

60

混勻,沸水浴30min,冷卻后,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,480nm下測(cè)定各管吸光值。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只要做一管。每個(gè)測(cè)定管需要設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

 

SS 活性計(jì)算

1、按照蛋白濃度計(jì)算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg蔗糖定義為一個(gè)酶活力單位。

SS 活性(μg/min/mg prot)= {C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1×A 測(cè)定管-A 對(duì)照管A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×A 測(cè)定管-A 對(duì)照管A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷Cpr

2、按照樣本鮮重計(jì)算

單位定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg蔗糖定義為一個(gè)酶活力單位。

SS 活性(μg/min/g 鮮重) = {C 標(biāo)準(zhǔn)管×V1×A 測(cè)定管-A 對(duì)照管A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×A 測(cè)定管-A 對(duì)照管A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷W

C 標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度,1000μg/mLV1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.01mL; V2:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;T :反應(yīng)時(shí)間:10min。

2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無(wú)法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

 

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):

 


會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。

溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

撥打電話
在線留言