1. 化學(xué)結(jié)構(gòu)與熒光標(biāo)記特性

Alexa Fluor-脫氧膽酸是一種結(jié)合了脫氧膽酸（Deoxycholic Acid, DCA）與Alexa Fluor染料的熒光探針。脫氧膽酸作為次級(jí)膽汁酸，具有兩親性結(jié)構(gòu)（疏水甾核與親水羧基），而Alexa Fluor染料（如Alexa Fluor 488或594）則賦予其高亮度、光穩(wěn)定性及pH不敏感性。兩者的共價(jià)連接通常通過(guò)羧基或羥基的活化實(shí)現(xiàn)，例如使用EDC/NHS介導(dǎo)的酰胺鍵形成。這種設(shè)計(jì)既保留了脫氧膽酸的生物活性，又引入了熒光示蹤功能，適用于動(dòng)態(tài)成像研究。

2. 生物學(xué)應(yīng)用與機(jī)制研究

在細(xì)胞生物學(xué)中，Alexa Fluor-脫氧膽酸可用于追蹤膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝途徑。脫氧膽酸是法尼醇X受體（FXR）和G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體（TGR5）的天然配體，標(biāo)記后的探針可通過(guò)共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)直觀觀察其內(nèi)吞、胞內(nèi)定位及核受體激活過(guò)程。例如，在肝細(xì)胞或腸上皮細(xì)胞中，該探針可揭示膽汁酸在回腸吸收后的轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)力學(xué)，或探究膽汁淤積條件下細(xì)胞對(duì)膽汁酸的異常響應(yīng)。

3. 藥物遞送與靶向性研究

脫氧膽酸因其與膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（如ASBT、NTCP）的高親和力，常被用作靶向遞送載體。Alexa Fluor標(biāo)記后，可通過(guò)熒光成像評(píng)估載體的組織分布效率。例如，在口服給藥系統(tǒng)中，該探針可直觀顯示藥物在腸道絨毛的攝取情況；在肝靶向遞送中，則能驗(yàn)證納米顆粒通過(guò)膽汁酸受體介導(dǎo)的肝細(xì)胞特異性富集。此外，其熒光特性可用于優(yōu)化遞送系統(tǒng)的載藥率與釋放動(dòng)力學(xué)。

4. 代謝疾病與毒性研究工具

在代謝性疾病模型中，Alexa Fluor-脫氧膽酸可作為研究膽汁酸代謝紊亂的工具。高濃度脫氧膽酸與胰島素抵抗、脂肪肝等病理過(guò)程相關(guān)，標(biāo)記后的探針可用于量化細(xì)胞或組織中膽汁酸的異常蓄積，并結(jié)合熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）技術(shù)分析其與受體的相互作用。在毒性研究中，該探針有助于評(píng)估藥物或環(huán)境毒素對(duì)膽汁酸腸肝循環(huán)的干擾。

5. 技術(shù)優(yōu)勢(shì)與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)考量

相較于傳統(tǒng)放射性標(biāo)記（如3H-DCA），Alexa Fluor-脫氧膽酸避免了放射性危害，且靈敏度接近。其熒光信號(hào)可通過(guò)多色標(biāo)記與其他細(xì)胞器探針（如LysoTracker）共定位，解析膽汁酸在溶酶體或內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的命運(yùn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)需注意濃度控制（避免高濃度脫氧膽酸的細(xì)胞毒性），并驗(yàn)證標(biāo)記后是否影響天然膽汁酸的受體結(jié)合活性。

6. 未來(lái)研究方向

當(dāng)前研究可進(jìn)一步拓展至多模態(tài)探針開(kāi)發(fā)，如結(jié)合近紅外Alexa Fluor染料用于活體成像，或與質(zhì)譜聯(lián)用實(shí)現(xiàn)定量代謝組學(xué)分析。此外，通過(guò)結(jié)構(gòu)修飾（如引入聚乙二醇鏈）可改善其水溶性，適用于更復(fù)雜的生理環(huán)境研究。

產(chǎn)地：西安瑞禧生物

用途：科研

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