一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與熒光特性

ATTO 700 NHS酯是一種基于萘酰亞胺結(jié)構(gòu)的熒光染料衍生物，其分子骨架由共軛芳香環(huán)體系構(gòu)成，通過(guò)引入磺酸基團(tuán)和N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）活性基團(tuán)實(shí)現(xiàn)功能化修飾。該染料的激發(fā)波長(zhǎng)位于680-690 nm范圍，發(fā)射峰值約在700-710 nm，屬于近紅外（NIR）熒光波段。其光譜特性使其在生物組織成像中具有較低的背景干擾，適用于多重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中的長(zhǎng)波長(zhǎng)通道設(shè)計(jì)。

二、反應(yīng)活性與標(biāo)記機(jī)制

NHS酯基團(tuán)是ATTO 700實(shí)現(xiàn)生物分子標(biāo)記的核心功能單元。該基團(tuán)可與伯胺（如賴(lài)氨酸殘基的側(cè)鏈氨基）發(fā)生高效酰胺化反應(yīng)，在溫和的緩沖條件下（pH 7.2-8.5）形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵。此反應(yīng)機(jī)制廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)、抗體或多肽的標(biāo)記，且可通過(guò)控制反應(yīng)時(shí)間與染料濃度優(yōu)化標(biāo)記效率。需注意的是，反應(yīng)體系中游離胺類(lèi)物質(zhì)的存在可能競(jìng)爭(zhēng)性抑制目標(biāo)分子的標(biāo)記效果。

三、光物理穩(wěn)定性分析

ATTO 700在連續(xù)光照條件下的熒光衰減曲線(xiàn)顯示其具有中等程度的光漂白抵抗能力。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，在100 mW/cm2激光激發(fā)下，其熒光強(qiáng)度下降速率約為0.05%/秒，低于部分傳統(tǒng)有機(jī)染料（如Cy5）。這種特性使其適用于長(zhǎng)時(shí)間活細(xì)胞成像或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，但需避免強(qiáng)光直射以延長(zhǎng)染料使用壽命。

四、生物相容性與標(biāo)記應(yīng)用

該染料在生理pH范圍內(nèi)表現(xiàn)出良好的溶解性，尤其在DMSO/水混合體系中可形成均一溶液。標(biāo)記后的復(fù)合物通常保持較高的水合粒徑穩(wěn)定性，適用于免疫熒光染色、流式細(xì)胞分析及體外診斷試劑開(kāi)發(fā)。在細(xì)胞穿透性測(cè)試中，ATTO 700標(biāo)記的肽段可有效進(jìn)入真核細(xì)胞胞質(zhì)，但核膜穿透效率受分子量限制。

五、多色標(biāo)記系統(tǒng)中的適配性

作為近紅外熒光團(tuán)，ATTO 700可與藍(lán)綠光區(qū)染料（如FITC、Cy3）組合構(gòu)建多色成像體系。其發(fā)射光譜與常見(jiàn)檢測(cè)濾光片的匹配性表明，在共聚焦顯微鏡系統(tǒng)中需選用700±15 nm帶通濾光片以?xún)?yōu)化信噪比。值得注意的是，染料間的光譜串?dāng)_可通過(guò)時(shí)間分辨成像或線(xiàn)性拆分算法進(jìn)一步降低。

六、儲(chǔ)存條件與操作建議

未使用的ATTO 700 NHS酯應(yīng)避光保存于-20℃干燥環(huán)境中，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致活性基團(tuán)水解。標(biāo)記反應(yīng)前需用無(wú)水DMSO溶解染料，工作濃度建議控制在1-10 mM范圍內(nèi)。標(biāo)記完成后，可通過(guò)凝膠電泳或HPLC分離純化未反應(yīng)染料，最終產(chǎn)物建議分裝凍存以減少降解風(fēng)險(xiǎn)。

產(chǎn)地：西安瑞禧生物

用途：科研

我們提供涵蓋peg多肽、ATTO、Alexa Fluor（AF染料）、AZDye、DyLight、Texas Red 以及 CF 系列染料。它們波長(zhǎng)跨度大，從可見(jiàn)光波段延伸至近紅外區(qū)域，為實(shí)驗(yàn)提供了豐富的選擇。其標(biāo)記方式多樣靈活，且擁有出色的穩(wěn)定性，在熒光成像、流式細(xì)胞術(shù)、免疫分析等實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色，是科研探索的有力工具助力實(shí)驗(yàn)精準(zhǔn)高效開(kāi)展。歡迎咨詢(xún)yff

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