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士鋒生物經(jīng)典補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)
點(diǎn)擊次數(shù)：644 發(fā)布時(shí)間：2013-12-30
（一）預(yù)備試驗(yàn)
1．綿羊紅細(xì)胞懸浮液的制備 通常用公綿羊紅細(xì)胞，將綿羊血液采集于帶有玻璃珠的無菌容器中，充分振搖，使脫去纖維，此時(shí)血液失去凝固性，稱脫纖血。
亦可用阿氏液保存血液，阿氏液配方如下：
葡萄糖 24.60g
氯化鈉 5.04g
檸檬酸鈉（含2個(gè)分子結(jié)晶水） 9.60g
蒸餾水 1 200ml
溶液配好后，高壓（10磅）滅菌10min，也可通過蔡氏濾器滅菌。溶液盛于瓶?jī)?nèi)，將綿羊血直接采入瓶?jī)?nèi)，血量應(yīng)大致與阿氏液量相等。搖勻，置冰箱中保存，可保存3周左右。
用時(shí)將血液移入離心管內(nèi)，加3～5倍量生理鹽水，離心沉淀洗滌三次，每次2 000r／min，離心10min，然后去掉上清液，血球泥用生理鹽水配成2.50％液應(yīng)用。
2．溶血素效價(jià)測(cè)定 溶血素是用綿羊紅細(xì)胞，經(jīng)多次免疫家兔，抽取家兔血清，加入甘油而成。在冰箱中可保存二年以上。每隔兩、三個(gè)月測(cè)定效價(jià)一次。溶血素可從生物制品廠購買。
溶血素效價(jià)測(cè)定的方法：先將溶血素稀釋成100倍，即0.20ml的溶血素（溶血素實(shí)量含0.10ml）加入9.80ml生理鹽水混合即可。然后按表6—1配成稀釋液：
表6-1溶血素稀釋表
經(jīng)典補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)（以馬鼻疽補(bǔ)反為例）
另取小反應(yīng)管一列，按次序從每一稀釋液取0.50ml分別加入各管中，添加時(shí)應(yīng)由稀釋度大的稀釋液加起，這樣可不必更換吸管。然后再加入生理鹽水1.00ml，1︰20補(bǔ)體和2.50％紅細(xì)胞懸液各0.50ml。在37℃水浴槽中放20min后判定結(jié)果。詳細(xì)操作程序見表6-2。
表6-2 溶血素效價(jià)測(cè)定示例