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新一代熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)
——更簡便、更靈敏、更精確
傳統(tǒng)報告基因檢測系統(tǒng)中多數(shù)使用的是螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶檢測體系，但底物需要在氧氣、ATP等同時存在條件下才能被催化發(fā)光，其發(fā)光信號的半衰期較短，穩(wěn)定性不佳等缺點，對實驗結(jié)果和使用造成影響和不便。針對傳統(tǒng)閃光型(flash type)熒光素的不足，圣生物經(jīng)過潛心研究開發(fā)出新一代的操作更便捷、半衰期更長、穩(wěn)定性更好的輝光型(glow type)熒光素酶檢測系統(tǒng)，適用于如哺乳動物細胞、原生質(zhì)體等樣本。
閃光型(flash type)與輝光型(glow type)對比
1
操作流程
▲ 閃光型(flash type)操作流程，較為繁瑣
▲ 輝光型(glow type)操作流程，一步完成檢測
2
性能對比
3
應(yīng)用方向
4
數(shù)據(jù)展示
▲ Yeasen檢測系統(tǒng)熒光強度和穩(wěn)定性與P品牌相當。
▲ Yeasen檢測系統(tǒng)和螢光素酶相互作用，螢光素發(fā)光淬滅效果與P品牌相當
▲ Yeasen檢測系統(tǒng)在常用培養(yǎng)基中正常發(fā)光，發(fā)光效果差異小于P品牌
FAQ
Q1：雙螢光素酶報告基因最適反應(yīng)溫度？
A：室溫條件下（20-22℃）。反應(yīng)組分如細胞裂解產(chǎn)物，底物工作液等都需要調(diào)整到室溫，因為兩種螢光素酶的反應(yīng)速率是受溫度影響，為了保證實驗一致性，推薦反應(yīng)室溫調(diào)至室溫。
Q2：雙螢光素酶報告基因載體該如何選擇？
A：1）螢火蟲螢光素酶建議選取pGL-3或pGL-4或者自己構(gòu)建的載體。。
2）海腎螢光素酶建議選取pRL-TK或pGL-4載體或者自己構(gòu)建相應(yīng)的載體。建議優(yōu)先選用中等強度的啟動子（如TK），而不使用強啟動子（如SV40、CMV），以免影響主報告基因的表達，或進行實驗摸索選擇合適的載體。
Q3：螢火蟲螢光素酶讀值和海腎螢光素酶讀值的比例多少時比較合適？
A：推薦對照組螢火蟲和海腎螢光素酶的讀值接近，或者海腎螢光素酶比螢火蟲螢光素酶的讀值略高。實際實驗過程中，由于螢火蟲螢光素酶質(zhì)粒和海腎螢光素酶的質(zhì)粒抽提的質(zhì)量不一致，待檢測目的調(diào)控元件的調(diào)控能力的不同等原因，我們推薦預實驗優(yōu)化螢火蟲螢光素酶質(zhì)粒和海腎螢光素酶質(zhì)粒的共轉(zhuǎn)染量。
訂購信息
貨號 | 規(guī)格 | |
Luciferase Reporter Gene Assay Kit 螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒 | 11401ES76/80 | 500/1000 T |
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒 | 11402ES60/80 | 100/1000 T |
Firefly Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit輝光型螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒 | 11404ES60/80 | 100/1000 T |
Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit 輝光型雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒 | 11405ES60/80 | 100/1000 T |
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產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control pGM-CMV-Luc 螢光素酶報告基因質(zhì)粒陽性對照 | 11556ES03 | 1 μg |
Luciferase Reporter Plasmid negative control 螢光素酶報告基因質(zhì)粒陰性對照 | 11555ES03 | 1 μg |
pGMLR-TK Luciferase Reporter Plasmid pGMLR-TK 海腎螢光素酶報告基因質(zhì)粒 | 11557ES03 | 1 μg |
pGMLR-CMV Luciferase Reporter Plasmid pGMLR-CMV 海腎螢光素酶報告基因質(zhì)粒 | 11558ES03 | 1 μg |
Dual Luciferase Reporter Gene Assay Lysis Component 雙螢光素酶報告基因檢測裂解組分 | 11406ES60/76 | 100/500 T |
Luciferase Reporter Gene Assay Component 螢火蟲螢光素酶檢測組分 | 11407ES60/76 | 100/500 T |
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 40802ES03 | 1.0 mL |
MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit 無內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒 | 19021ES50/70 | 50/200 T |
