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克隆技術(shù),又稱為“生物放大技術(shù)”,目前應(yīng)用泛的技術(shù)為“分子克隆”,即通過重組技術(shù)將目的DNA片段按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來,在特定的受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制并得到表達(dá),產(chǎn)生新的遺傳性狀的技術(shù)。大部分的分子克隆方法,諸如傳統(tǒng)分子克隆、TA克隆、Gatway克隆、TOPO克隆、無縫克隆等都繞不開目的片段制備、載體制備、連接、轉(zhuǎn)化、篩選等等步驟。其中,載體和片段連接的方法是分子克隆的核心步驟,接下來小翌就具體解析一下載體和片段連接的過程,為您的實(shí)驗(yàn)提供好方法。根據(jù)市面上主要的分子克隆技術(shù),載體與片段的
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關(guān)于USER酶混合物的應(yīng)用,看這篇就夠了!
尿嘧啶特異性切除試劑(Uracil-SpecificExcisionReagent,USER)是由尿嘧啶DNA糖基化酶(UracilDNAGlycosylase,UDG)和核酸內(nèi)切酶Ⅷ(EndonucleaseVIII,EndoⅧ)(戳鏈接了解詳情)兩種酶混合而成。UDG識別ssDNA或dsDNA上的dU堿基并形成AP位點(diǎn),但磷酸二酯骨架結(jié)構(gòu)保持完整。EndoVIII的裂解酶活性能夠使AP位點(diǎn)的3′和5′端的磷酸二酯鍵斷裂,釋放無堿基的脫氧核糖,形成單核苷酸間隙。因此,USER酶混合物能在DNA -
國際期刊 | 翌圣qPCR Mix助力清華研究團(tuán)隊(duì)Nature發(fā)文
植物進(jìn)化出了感知環(huán)境刺激和誘導(dǎo)新陳代謝的能力,當(dāng)受到環(huán)境刺激時(shí),植物便會產(chǎn)生揮發(fā)性化合物(volatileorganiccompounds,VOCs)。揮發(fā)性有機(jī)化合物能作為特殊通信信號發(fā)揮作用,被鄰近的接收植物感知以引起防御,這種現(xiàn)象被稱為氣傳性免疫(airbornedefense,AD)。幾十年來,人們在許多植物中都觀察到了這種植物間通訊(plant-plantcommunication,PPC)現(xiàn)象及其生物學(xué)和生態(tài)學(xué)重要性,然而VOCs介導(dǎo)的PPC的分子機(jī)制在很大程度上還不清楚。蚜蟲是全球 -
克隆技術(shù),又稱為“生物放大技術(shù)”,目前應(yīng)用泛的技術(shù)為“分子克隆”,即通過重組技術(shù)將目的DNA片段按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來,在特定的受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制并得到表達(dá),產(chǎn)生新的遺傳性狀的技術(shù)。前兩期小翌給小伙伴們介紹了一些傳統(tǒng)的、應(yīng)用范圍廣的、新型的分子克隆方法。相信大家已經(jīng)發(fā)現(xiàn),大部分的分子克隆方法,諸如傳統(tǒng)分子克隆、TA克隆、Gatway克隆、TOPO克隆、無縫克隆等都繞不開目的片段制備、載體制備、連接、轉(zhuǎn)化、篩選等等步驟,接下來小翌就具體解析一下載體和目的片段制備的過程,為您的實(shí)驗(yàn)提供好方
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精品推薦 | 高性能“一管式”全預(yù)混qPCR試劑強(qiáng)勢來襲!
二代PCR(熒光定量PCR)因其高靈敏、特異性強(qiáng)的優(yōu)勢已被廣泛地應(yīng)用于分子生物學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域,如傳感染疾病、生殖遺傳、腫瘤早篩伴隨診斷、法醫(yī)鑒定、動物疫病檢測、食品安全監(jiān)測、生物制品的評價(jià)等研究。在各類規(guī)?;a(chǎn)/檢測過程中,常規(guī)的qPCR反應(yīng)體系配制步驟復(fù)雜,極易存在因錯(cuò)加、漏加或部分試劑失效而導(dǎo)致檢測結(jié)果有誤的風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)大量的冗雜重復(fù)操作大大降低工作效率。為滿足使用客戶對于高效便捷、操作簡單的需求,翌圣最新推出兩款支持引物探針全預(yù)混的qPCR預(yù)混液,可提前配制好全預(yù)混體系,檢測時(shí)只需加入樣 -
上新 | 高酶活性、高穩(wěn)定性能,酶法轉(zhuǎn)化原料助力甲基化研究!
DNA甲基化DNA甲基化是指生物體在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNAmethyltransferase,DMT)的催化下,以s-腺苷甲硫氨酸(SAM)為甲基供體,將甲基轉(zhuǎn)移到特定的堿基上的過程。在哺乳動物中DNA甲基化主要發(fā)生在5’-CpG-3’的C上生成5-甲基胞嘧啶(5mC)。多項(xiàng)研究表明DNA低甲基化與早期腫瘤發(fā)生發(fā)展及抗癌耐藥性相關(guān),已成為應(yīng)用潛力的生物標(biāo)志物。圖1.DNA甲基化示意圖酶法轉(zhuǎn)化-EM-seq利用氧化酶(TET酶)、T4-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(T4-BGT)、脫氨酶(APOBEC酶)將未甲 -
mRNA實(shí)操訓(xùn)練營來了!學(xué)員招募中…
mRNA實(shí)操訓(xùn)練營來了!學(xué)員招募中…mRNA(MessengerRNA或信使RNA)在人類生物學(xué)中起著基本作用,它轉(zhuǎn)移存儲在DNA中的指令來制活細(xì)胞所需的蛋白質(zhì)。近年來,mRNA技術(shù)的發(fā)展應(yīng)用持續(xù)得到關(guān)注,mRNA藥物也以安全、高效、周期短等的優(yōu)勢,目前應(yīng)用在疫苗、腫瘤免疫、罕見病等多個(gè)領(lǐng)域。為加強(qiáng)科研工作者對mRNA的熟悉了解,鞏固大家對mRNA技術(shù)的實(shí)際操作,翌圣生物將于10月21日(周六)-10月22日(周日)在上海市浦東新區(qū)周浦鎮(zhèn)青黛路537號3號樓翌圣生物舉辦《mRNA實(shí)操訓(xùn)練營-第一 -
預(yù)混or非預(yù)混,RNA建庫試劑盒,你pick哪個(gè)呢?
預(yù)混or非預(yù)混,RNA建庫試劑盒,你pick哪個(gè)呢?RNA測序,又稱為轉(zhuǎn)錄組測序,是高通量測序中應(yīng)用非常廣泛的組學(xué)技術(shù)之一。其研究應(yīng)用有:不同處理組差異基因表達(dá)分析;mRNA表達(dá)量的差異研究;mRNA結(jié)構(gòu)上的差異(可變剪接、融合基因、點(diǎn)突變(SNP)。RNA測序?qū)嶒?yàn)流程如下:目前,翌圣生物RNA建庫試劑盒不斷進(jìn)行升級,試劑盒越來越便捷,快速。圖.翌圣生物RNA建庫試劑盒進(jìn)化軸目前,RNA建庫試劑盒已經(jīng)進(jìn)化到預(yù)混版建庫試劑盒,試劑組分已經(jīng)簡化,每步操作只加一次試劑即可進(jìn)行PCR。圖.非預(yù)混和預(yù)混版