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    E.coli宿主菌應用及其殘留RNA質(zhì)控已知,大腸桿菌(E.coli)表達系統(tǒng)是分子量較小蛋白或結(jié)構(gòu)相對簡單蛋白表達的宿主,主要表達胰島素、干擾素和白介素等細胞因子類藥物,這些藥物中宿主殘留核酸和蛋白的含量需要嚴格控制。另外,在細胞和基因治療等領域,E.coli宿主菌通常被用于起始原材料質(zhì)粒DNA的制備。質(zhì)粒DNA做為細胞治療和基因治療藥物的中間品或終產(chǎn)品,其中RNA片段的殘留可能會降低DNA產(chǎn)品純度,還可能會對其品質(zhì)和安全性等產(chǎn)生一定的干擾,因此需對質(zhì)粒DNA樣本中宿主菌殘留RNA的含量加以限
  • 漲知識 | qPCR專場二:如何獲取高質(zhì)量的cDNA模板?

    熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的,并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里,所以在實驗過程中,我們需要注意諸多細節(jié),謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了,我怎樣才能做好qPCR實驗,拿到實驗結(jié)果,發(fā)表高分文章,走上人生呢?對于熒光定量PCR反應體系而言,cDNA模板的質(zhì)量至關重要。c
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