聯系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年您現在的位置： 翌圣生物科技（上海）股份有限公司>>細胞生物學>> 40805ES02Hieff Trans懸浮細胞脂質體核酸轉染試劑
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 聯系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 40805ES02 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業(yè) |
以無菌的液體形式提供。
產品介紹
Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent
Hieff TransTM懸浮細胞脂質體核酸轉染試劑
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格元 | * |
Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent Hieff TransTM懸浮細胞脂質體核酸轉染試劑 | 40805ES02 | 0.5ml | 4℃ | 948.00 | 598.00 |
40805ES03 | 1.0ml | 4℃ | 1678.00 | 998.00 | |
40805ES08 | 5×1ml | 4℃ | 5268.00 | 3698.00 |
產品描述
Hieff TransTM懸浮細胞脂質體核酸轉染試劑是一種陽離子脂質體轉染試劑，經優(yōu)化專門用于懸浮細胞的轉染，且適用于DNA、RNA和寡核苷酸的轉染，對大多數真核細胞具有很高的轉染效率。
Hieff TransTM懸浮細胞脂質體核酸轉染試劑以無菌的液體形式提供。
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。產品4oC保存，一年有效。不可冷凍！
注意事項
1. 為得到*的轉染效率，請先用無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEMⅠ培養(yǎng)基）稀釋Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent（以下簡稱Hieff TransTM），之后與DNA或RNA做混合。
2. 使用高質量的DNA或RNA有助于獲得較高的轉染效率，務必確保質粒的高純度和無菌狀態(tài)，*去除質粒提取過程中可能殘留的苯酚和高鹽，因為上述酚類會對細胞造成損失，而高鹽分會干擾“Hieff TransTM-復合物"的形成。質粒中的內毒素也是轉染的大敵，務必去除。
3. 轉染時培養(yǎng)基中不能添加抗生素。
4. 陽離子脂質體應該在4℃保存，要注意避免多次反復長時間開蓋，因為可能會導致脂質體氧化而影響轉染效率。
5. 需優(yōu)化DNA濃度和陽離子脂質體試劑量以得到zui大的轉染效率。DNA和Hieff TransTM的比例，通常推薦是1:2 或者1:3。
推薦轉染條件（以293懸浮培養(yǎng)細胞，質粒DNA轉染為例）
zui終轉染體積：30ml
轉染細胞數目：3×107 cells（zui終細胞密度：1×106 cells/ml），轉染之前需要確保細胞健康，細胞活力>90%。
質粒DNA量：20–40 μg (typically use 30 μg)
轉染試劑量：40–80 μL (typically use 60 μL). Use 2 μL Hieff TransTM per 1 μg of plasmid DNA transfected.
操作步驟（293懸浮細胞）
使用以下步驟在30ml總體系內轉染293細胞，轉染過程中生長培養(yǎng)基內不要添加抗生素，否則會降低轉染效率。轉染過程請同時設置陽性對照組和陰性對照組（無DNA，無Hieff TransTM）。
【注】對于其他的培養(yǎng)總體系，按比例放大或者縮小各組分用量。
1. 轉染當天，在配制復合物之前，準備轉染需要的細胞量【見上推薦轉染條件，即28ml 生長培養(yǎng)基內加入3×107 cells，臺盼藍排斥法確定細胞活力和小量細胞成團量。劇烈漩渦混勻45s以打破細胞團，并用計數器測定總細胞量。細胞活力需>90%。】 【注】：為了達到*效率，確保單細胞懸液。
2. 按照以下方法配制Hieff TransTM-DNA復合物，
a, 用無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM I）稀釋30μg質粒DNA，使其終體積為1ml；
b, 用無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM I）稀釋60μl Hieff TransTM，使其終體積為1ml；輕輕混勻，于室溫孵育5min；【注意】：過長時間孵育會降低效率。
c, 孵育5min之后，將稀釋的質粒DNA加入稀釋的Hieff TransTM，使其總體積為2ml。輕輕混勻。
d, 室溫孵育20-30min，使得DNA-Hieff TransTM復合物形成。此時溶液可能會混濁，但不會影響轉染。
【注意】：DNA-脂質體復合物室溫至少穩(wěn)定保存5h。
3. 孵育*后，將2ml DNA-Hieff TransTM復合物加入28ml 含293懸浮細胞的生長培養(yǎng)基內，使得細胞zui終的密度約為1×106 cells/ml。對于陰性對照，用2ml無血清培養(yǎng)基（如OPTI-MEM I）替換。
4. 37℃，8% CO2軌道搖床培養(yǎng)，轉速125rpm，直至進行轉基因表達分析，無需去掉復合物或更換培養(yǎng)基。然而，可能有必要在4-6h后更換生長培養(yǎng)基，不會降低轉染活性。
相關產品
產品編號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 價格元 | *元 |
40801ES04 | HG_TransGeneTM tranfection reagent | 1.5ml | 3000.00 | / |
40802ES01 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑 | 100μl | 168.00 | 118.00 |
40802ES02 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑 | 0.5ml | 738.00 | 488.00 |
40802ES03 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑 | 1.0ml | 1308.00 | 868.00 |
40802ES08 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑 | 5×1ml | 4878.00 | 3248.00 |
40803ES70 | Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸鈣法細胞轉染試劑 | 200T | 298.00 | / |
40804ES76 | Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml） | 500μl | 180.00 | / |
40804ES86 | Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml） | 5×500μl | 500.00 | / |
40805ES01 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 100ul | 228.00 | 178.00 |
40805ES02 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 0.5ml | 948.00 | 598.00 |
40805ES03 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 1.0ml | 1678.00 | 998.00 |
40805ES08 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent | 5×1ml | 5268.00 | 3698.00 |
