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11810ES80XL10-Gold化學感受態(tài)
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 11810ES80 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：870更新時間：2022-03-21 16:25:53
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
|---|
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學感受態(tài)細胞 | 11810ES80 | 100 μl×10管 | -80℃ | 287 |
產(chǎn)品描述
XL10-Gold化學感受態(tài)細胞是經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，特別適合于大分子量DNA的高效轉(zhuǎn)化。具有四環(huán)素和氯霉素抗性，使用Puc19質(zhì)粒測得其轉(zhuǎn)化效率達108cfu/μg，主要具有如下特點：
① Hte表型可增強較大分子量質(zhì)粒和連接產(chǎn)物的高效轉(zhuǎn)化；
② 具有限制性內(nèi)切酶缺陷性，更利于克隆 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提??；
③ 更適于質(zhì)粒文庫的構(gòu)建；
④ 具有lacIqZΔM15，可用于藍、白斑篩選。
本品基因型：
TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F′proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 規(guī)格 | 保存溫度 |
11810-A | XL10-Gold化學感受態(tài)細胞 | 100 μl × 10 | -80℃ |
11810-B | pUC19（10pg/μl） | 10 μl × 1 | -20℃ |
運輸與保存方法
干冰運輸。
XL10-Gold化學感受態(tài)細胞-80℃保存，pUC19質(zhì)粒-20℃保存。有效期半年。不能保存于液氮！
注意事項
1）感受態(tài)細胞應保存在-80℃，不可反復凍融和放置時間過長，以免降低感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率。
2）整個轉(zhuǎn)化操作，嚴格根據(jù)相應溫度及無菌條件要求進行。
3）為確保zui高轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程應盡量輕柔，并保持低溫，且每次轉(zhuǎn)化感受態(tài)使用量，不低于100μl。
4）為防止轉(zhuǎn)化不成功，可以保留部分連接反應液，以重新轉(zhuǎn)化，zui低化實驗可能遇到的風險。
使用方法
1）取100 μl感受態(tài)細胞置于冰浴中融化。
2）向100μl感受態(tài)細胞懸液中加入0.1-50ng（＜10μl /100μl感受態(tài)）目的DNA或2μl連接產(chǎn)物，輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30min。
3）置于42℃水浴中熱激30s，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冷卻2-3min，該過程不要搖動離心管，否則會降低轉(zhuǎn)化效率。
4）向離心管中加入900μl 42℃預熱的無菌NZY+培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1h（225-250rpm），目的是促使菌體復蘇。
【注】：此步也可用LB培養(yǎng)基（不含抗生素）進行菌體復蘇。
5）取上述≤200μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂至含有相應抗生素的LB固體平板上，將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)一個晚上。
【注】：如需做藍白斑篩選，需至少孵育17h，以充分顯色。
附錄一：常用抗生素工作濃度
抗生素 | 翊圣貨號 | 常用工作濃度 |
Ampicillin 氨芐青霉素 | 60203ES10 | 100 μg/ml |
Carbenicillin羧芐青霉素 | 60202ES08 | 100 μg/ml |
Chloramphenicol 氯霉素 | 60205ES10 | 33 μg/ml |
Kanamycin 卡那霉素 | 60206ES10 | 30 μg/ml |
Streptomycin 鏈霉親和素 | 60211ES60 | 25 μg/ml |
Tetracycline 四環(huán)素 | 60212ES25 | 15 μg/ml |
附錄二 NZY+培養(yǎng)基配方
10 g of NZ amine (casein hydrolysate)
5 g of yeast extract
5 g of NaCl
Add deionized H2O to a final volume of 1 liter
Adjust to pH 7.5 using NaOH and then autoclave
Add the following filer-sterilized supplements prior to use:
12.5 ml of 1 M MgCl2
12.5 ml of 1 M MgSO4
20 ml of 20% (w/v) glucose (or 10 ml of 2 M glucose)
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