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Salmonella IgG ELISA
Salmonella IgG ELISA，即沙門氏菌 IgG 酶聯(lián)免疫吸附測定，是一項在微生物檢測及相關(guān)醫(yī)學(xué)、食品科學(xué)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的重要檢測技術(shù)，主要用于精準(zhǔn)檢測樣本中針對沙門氏菌的 IgG 抗體含量。
沙門氏菌是一種常見的食源性致病菌，可引發(fā)人類和動物的多種疾病，如腸胃炎、傷寒等，嚴(yán)重威脅公眾健康和食品安全。人體在感染沙門氏菌后，免疫系統(tǒng)會啟動免疫應(yīng)答反應(yīng)，其中 B 淋巴細(xì)胞會產(chǎn)生針對沙門氏菌的特異性抗體，IgG 便是其中一種重要的抗體類型，且在感染后期及康復(fù)期持續(xù)存在。Salmonella IgG ELISA 正是基于抗原抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)原理進行設(shè)計。在檢測體系中，首先將經(jīng)過處理的沙門氏菌抗原包被在固相載體（如酶標(biāo)板）表面，形成固相抗原層。當(dāng)加入待檢測樣本（如血清、血漿或其他相關(guān)生物樣本）時，若樣本中存在針對沙門氏菌的 IgG 抗體，這些抗體就會與固相抗原特異性結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。接著，加入酶標(biāo)記的抗人 IgG 抗體（二抗），該二抗能夠與已結(jié)合在固相載體上的 IgG 抗體特異性結(jié)合，從而構(gòu)建起 “固相抗原 - 抗沙門氏菌 IgG 抗體 - 酶標(biāo)二抗" 的夾心結(jié)構(gòu)。隨后，添加酶的底物，在酶的催化作用下，底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測的信號，通常表現(xiàn)為顏色變化（若使用顯色底物）或熒光信號增強（若采用熒光底物）。通過酶標(biāo)儀測定信號強度，并與已知濃度的抗沙門氏菌 IgG 抗體標(biāo)準(zhǔn)品所繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線進行對比，即可準(zhǔn)確計算出樣本中抗沙門氏菌 IgG 抗體的含量。
在實際操作過程中，Salmonella IgG ELISA 有著規(guī)范且易于掌握的流程。實驗人員需嚴(yán)格按照試劑盒的操作手冊進行操作。首先，規(guī)范采集合適的樣本，并對樣本進行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，如離心去除雜質(zhì)，確保樣本適合檢測。然后，將處理好的樣本和不同濃度的抗沙門氏菌 IgG 抗體標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加入酶標(biāo)板的對應(yīng)孔中。將酶標(biāo)板置于特定溫度環(huán)境下溫育，使抗原抗體充分結(jié)合，溫育的時間和溫度都有嚴(yán)格要求。溫育結(jié)束后，通過多次洗滌步驟，徹di清除未結(jié)合的物質(zhì)，以降低非特異性信號干擾。隨后加入酶標(biāo)二抗，再次溫育使酶標(biāo)二抗與已結(jié)合的抗沙門氏菌 IgG 抗體牢固結(jié)合。接著進行第二次洗滌，去除多余的酶標(biāo)二抗。最后加入底物，啟動反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后立即使用酶標(biāo)儀讀取信號值，完成整個檢測流程。雖然操作步驟較為繁雜，但只要嚴(yán)格遵守操作規(guī)范，就能獲得準(zhǔn)確可靠的檢測結(jié)果。
Salmonella IgG ELISA 技術(shù)具備諸多突出優(yōu)勢。其靈敏度ji高，能夠精準(zhǔn)檢測到樣本中極微量的抗沙門氏菌 IgG 抗體，這對于早期發(fā)現(xiàn)沙門氏菌感染以及判斷感染后的免疫狀態(tài)具有重要意義。特異性強，通過抗原抗體的特異性結(jié)合以及雙抗體夾心檢測模式，極大地減少了與其他抗體或物質(zhì)的交叉反應(yīng)，有力保證了檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。此外，該技術(shù)重復(fù)性良好，無論是同一批次內(nèi)還是不同批次間的檢測，都能得到較為一致的結(jié)果，為不同實驗室間的數(shù)據(jù)比較以及沙門氏菌感染相關(guān)研究的準(zhǔn)確性提供了堅實保障。
