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Solid - Phase Enzyme - Linked Immunosorbent Assay ELISA
Solid - Phase Enzyme - Linked Immunosorbent Assay(SLA) ELISA，即固相酶聯(lián)免疫吸附測定（SLA ），是一種在免疫學(xué)檢測領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的技術(shù)，以其高靈敏度、特異性和定量檢測能力，為眾多科研與臨床診斷工作提供關(guān)鍵支持。
其核心原理基于抗原與抗體的特異性結(jié)合以及酶的催化放大作用。首先，將已知的抗原或抗體通過物理吸附或化學(xué)偶聯(lián)的方式固定在固相載體（如聚苯乙烯微孔板）表面。當(dāng)加入含有目標(biāo)體或抗原的樣品時，它們會與固相載體上的對應(yīng)物質(zhì)發(fā)生特異性結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。隨后，加入酶標(biāo)記的二抗，二抗會與已結(jié)合的抗原 - 抗體復(fù)合物中的抗體部分結(jié)合。此時，通過加入酶的底物，酶會催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測的信號，通常是顏色變化或熒光信號。信號的強(qiáng)度與樣品中目標(biāo)物質(zhì)的含量成正比，通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比，就能準(zhǔn)確測定樣品中目標(biāo)抗體或抗原的濃度。
在操作流程方面，第一步是包被。將抗原或抗體以合適的濃度包被在微孔板孔中，經(jīng)過一定時間的孵育，使其牢固吸附在板壁上，之后進(jìn)行封閉，用無關(guān)蛋白封閉微孔板上未結(jié)合位點(diǎn)，減少非特異性吸附。接著加入樣品，與包被在板上的抗原或抗體反應(yīng)，孵育一段時間后洗滌，去除未結(jié)合的雜質(zhì)。再加入酶標(biāo)二抗，再次孵育和洗滌。最后加入底物，在酶的作用下底物發(fā)生顯色反應(yīng)，用酶標(biāo)儀讀取吸光度值，計算樣品中目標(biāo)物質(zhì)的含量。
SLA ELISA 在多個領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用。在醫(yī)學(xué)診斷中，可用于檢測病原體抗體，輔助診斷感染性疾病，如乙肝、丙肝抗體檢測；還可用于檢測腫瘤標(biāo)志物，幫助腫瘤的早期篩查與診斷。在科研領(lǐng)域，常用于研究細(xì)胞因子、激素等生物分子的表達(dá)水平，助力免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等基礎(chǔ)研究。例如在研究免疫細(xì)胞活化過程中細(xì)胞因子分泌變化時，通過 SLA ELISA 可精準(zhǔn)測定不同時間點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子的含量。
SLA ELISA 具有諸多優(yōu)勢。靈敏度高，能夠檢測出極微量的目標(biāo)物質(zhì)；特異性強(qiáng)，抗原 - 抗體的特異性結(jié)合有效減少了交叉反應(yīng)，提高檢測準(zhǔn)確性；可實現(xiàn)定量檢測，能準(zhǔn)確測定樣品中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。不過，它也存在一定局限性，檢測過程較為繁瑣，需要嚴(yán)格控制操作條件，如溫度、時間、試劑濃度等，任何一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)偏差都可能影響結(jié)果準(zhǔn)確性；且檢測成本相對較高，對儀器設(shè)備和操作人員的專業(yè)要求也較高。但總體而言，SLA ELISA 憑借其出色的性能，在免疫檢測領(lǐng)域占據(jù)重要地位，持續(xù)推動著科研與臨床診斷工作的發(fā)展。
