重組核心鏈霉親和素（r-cSA）

品    名：重組核心鏈霉親和素（r-cSA）

英文名稱：Recombinant Core Streptavidin

規(guī)    格：1 mg ，10 mg ，100 mg ，500 mg

產(chǎn)品形式：冷凍干粉（20mM HEPES 緩沖液、海藻糖、TCEP ，pH 7.0）

分 子 量：四聚體 54.0kDa，單體 13.5kDa

活    性：≥15 U/mg 蛋白（Green 改良法測定）

純    度：≥95%（SDS-PAGE 檢測）

濃度測定：紫外吸收法，消光系數(shù) E(0.1% at 280 nm)=3.11

內(nèi) 毒 素：≤5EU/mg

來    源：大腸桿菌發(fā)酵工程菌株

保存條件：-20℃保存

相關(guān)介紹：

鏈霉親和素（Streptavidin，SA）是阿維丁鏈霉菌（Streptomyces avidinii）在生長過程中分泌的一 種同型四聚體蛋白。同親和素一樣，一摩爾的鏈霉親和素可以結(jié)合四摩爾的生-物素，與生物-素具有 很高的親和力。由于鏈霉親和素不含糖基且等電點(diǎn)接近于中性，因此鏈霉親和素在檢測應(yīng)用中具有 比親和素更低的非特異性結(jié)合水平。重組核心鏈霉親和素與天然鏈霉親和素相比，去除與活性無關(guān) 的序列，僅保留與活性有關(guān)的核心序列，穩(wěn)定性、溶解性等方面均優(yōu)于天然鏈霉親和素，并且在 C 端添加了半胱-氨酸，可以定向與載體共價(jià)鍵合。(該重組鏈霉親和素 pI：6.04)

該制品已被廣泛應(yīng)用于多種生物技術(shù)領(lǐng)域，諸如：包被免疫檢測用微孔板，制備 SA  偶聯(lián)酶制劑，SA 偶聯(lián)熒光素、SA 偶聯(lián)磁珠等，進(jìn)而參與酶聯(lián)免疫吸附和酶催化放大實(shí)驗(yàn)，免疫組化化學(xué)、生物分子純化、生物傳感器、生物納

使用方法：（僅供參考）米微球、預(yù)靶向制藥研究和生物芯片被料等。

由于產(chǎn)品生產(chǎn)工藝中凍干環(huán)節(jié)會(huì)引入保護(hù)劑等，為減少您的實(shí)驗(yàn)誤差，建議先通過內(nèi)部檢測方法，產(chǎn)品中蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確定量后，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，并按實(shí)際情況進(jìn)行產(chǎn)品用量調(diào)整。建議優(yōu)先選擇紫外吸收法進(jìn)行定量，方法如下：

將樣品從低溫條件下拿出后，平衡至室溫，并擦去瓶外附著的冷凝水，小心打開瓶蓋，防止干粉飛濺損失。用去離子水或緩沖液進(jìn)行復(fù)溶，充分溶解后，稀釋至合適濃度，小心移入比色皿中，以去離子水或緩沖液為空白對照，測定樣品在280 nm 處的吸光值（建議吸光值控制在0.1-1.5 區(qū)間內(nèi)），將其代入以下公式計(jì)算蛋白質(zhì)濃度：

式中：C：樣品原液的蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度（mg/mL）

A280nm ：蛋白質(zhì)溶液在 280nm 處測得的吸光值 N：稀釋倍數(shù)

E(0.1% at 280nm) ：1 mg/mL 蛋白質(zhì)的消光系數(shù)

例如將本產(chǎn)品凍干粉充分溶解并混勻后，取適量原液稀釋 10  倍，測得其在 280 nm  處的吸光值為 0.933，則原液的蛋白濃度為 10×0.933/3.11=3 mg/mL。

注意事項(xiàng)：

1.  重組核心鏈霉親和素凍干粉易溶于水，溶解性可達(dá)10 mg / mL  或更高；

2.  建議使用純水溶解；

3.  如有未溶解物質(zhì)，建議延長復(fù)溶時(shí)間。也可以通過離心或其他方式除去不溶物后，再用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)，不會(huì)對總蛋白產(chǎn)生很大的影響。

4.  考慮到蛋白質(zhì)特殊性，凍干粉建議現(xiàn)用現(xiàn)配，溶解后應(yīng)避免反復(fù)凍融，如需多次使用，建議按需分裝后凍存（-20℃);避免在4℃下長期存放。