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油紅O染色實驗代測

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所  在  地上海市

更新時間:2024-10-26 15:50:44瀏覽次數(shù):789次

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油紅O染色實驗代測
實驗樣本類型:冰凍切片/細胞
主要用途:觀察組織內(nèi)脂肪的含量和定位
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油紅O染色實驗代測

油紅O染色簡介:

油紅O對脂滴的染色機制一般認為是物理學(xué)上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂質(zhì)染色,即油紅O先溶于60%異丙醇中,然后切片浸入油紅O染液中時,油紅O在組織脂質(zhì)的溶解度較60%異丙醇中的溶解度高,所以在染色時油紅O從60%異丙醇中轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)中使脂滴顯示紅色。

油紅O染色步驟(僅供參考):

1、 固定:將冰凍切片復(fù)溫干燥10min;細胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次,5min/次。

2、 染色:入油紅O工作液孵育10-15min;細胞爬片破膜10-15min,PBS漂洗3次,5min/次,入油紅O工作液37°染色1-2h。

3、 分化:75%酒精分化2s,水洗1min。

4、 復(fù)染細胞核:Harris蘇木素復(fù)染1-2min左右,自來水洗,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,氨水返藍,流水沖洗。

5、 封片:用紙巾吸去周邊水分,甘油明膠封片。

染色結(jié)果:脂滴呈橘紅色至鮮紅色,細胞核藍色。

注意事項:

1、油紅O是對脂類物質(zhì)進行染色,石蠟切片在處理過程中脂類物質(zhì)無法保存,所以石蠟切片不能進行油紅O染色。

2、油紅O染液使用一段時間后,染出的脂滴顏色會偏黃,此時就需要更換染液。

3、油紅染色時,動作要輕,因為脂滴易移位,并且在封片時應(yīng)避免蓋玻片滑動;

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