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小鼠免疫球蛋白M(IgM) 酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用小鼠免疫球蛋白M(IgM)抗體包被于酶標(biāo)板上,實驗時標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的IGG會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IGM抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。小鼠IGM抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,TMB在辣根過氧化物酶的催化下現(xiàn)藍色,加終止液后變黃。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中小鼠免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒的濃度。
標(biāo)本收集:
血清:全血標(biāo)本于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
血漿:抗凝劑推薦使用EDTA,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。
其它生物標(biāo)本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
標(biāo)本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃/-80℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,6個月內(nèi)進行檢測,4℃保存的應(yīng)在1周內(nèi)進行檢測。
如果樣本中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請根據(jù)實際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。
試驗所需自備物品:
酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水
吸水紙
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