DiFi人結直腸癌細胞系
DiFi人結直腸癌細胞系源自人體結直腸癌組織，是研究結直腸癌發(fā)生發(fā)展機制、開發(fā)新型治療手段的重要模型。在顯微鏡下，DiFi 細胞呈現典型的上皮樣癌細胞形態(tài)，多為多邊形或不規(guī)則形，細胞邊界清晰，但由于旺盛的增殖能力，常相互堆疊形成復層結構，局部可見類似腺腔樣的結構，模擬了結直腸癌在體內的組織學特征。細胞胞質豐富，經染色后呈弱嗜酸性，內部含有大量線粒體、內質網等細胞器，為細胞的快速生長、代謝及侵襲轉移提供充足能量和物質基礎；細胞核大且深染，核質比例失調，核仁明顯且數目增多，部分細胞可見多核及異常核分裂象，直觀體現出其惡性腫瘤細胞的本質。
DiFi 細胞具有顯著的生物學特性，使其成為結直腸癌研究的理想對象。在增殖能力方面，細胞周期調控基因異常表達，Cyclin D1、CDK4 等蛋白的高表達促使細胞周期蛋白依賴性激酶持續(xù)活化，推動細胞從 G1 期快速進入 S 期，在適宜培養(yǎng)條件下，其倍增時間約為 36 - 48 小時 。侵襲與轉移能力上，DiFi 細胞大量分泌基質金屬蛋白酶 MMP-2 和 MMP-9，這些蛋白酶如同 “分子剪刀"，可高效降解結直腸組織細胞外基質中的膠原蛋白、層粘連蛋白等成分，破壞基底膜完整性，為癌細胞突破上皮屏障創(chuàng)造條件；細胞表面整合素家族蛋白如 αvβ3、α5β1 表達上調，增強細胞與細胞外基質的黏附與脫離能力；同時，上皮 - 間質轉化（EMT）在 DiFi 細胞中頻繁發(fā)生，E-cadherin 表達下調，N-cadherin 和 Vimentin 表達上調，賦予細胞間質細胞特性，顯著提升其遷移和侵襲能力。此外，DiFi 細胞中 Wnt/β-catenin、PI3K/AKT 等信號通路持續(xù)激活，不僅維持癌細胞的存活與增殖，還參與調控侵襲轉移相關基因的表達，進一步加劇腫瘤的惡性進展。值得關注的是，DiFi 細胞對部分hua療藥物存在天然耐藥性，這使其成為研究結直腸癌耐藥機制的重要模型。
培養(yǎng) DiFi 人結直腸癌細胞系需遵循嚴格的操作規(guī)范。常用含 10% 優(yōu)質胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基作為基礎培養(yǎng)體系，胎牛血清中豐富的生長因子、氨基酸等物質，能夠滿足細胞生長和代謝需求；添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液，預防細菌污染。將細胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中，模擬人體生理環(huán)境，維持細胞內酸堿平衡與酶活性。當細胞匯合度達到 80% - 90% 時，使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進行消化傳代，消化過程需在顯微鏡下實時觀察，避免過度消化損傷細胞，傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。凍存時，采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液，遵循程序降溫原則，先于 - 80℃冰箱過夜，再轉移至液氮中長期保存。在培養(yǎng)過程中，還需定期檢測細胞的生長狀態(tài)、基因型穩(wěn)定性，確保實驗結果的可靠性。
在科研應用領域，DiFi 細胞系成果豐碩。在藥物研發(fā)方面，它是篩選抗結直腸癌藥物的重要模型，科研人員通過在 DiFi 細胞上測試新型靶向 EGFR、VEGF 的抑制劑、免疫檢查點抑制劑等，評估藥物對癌細胞增殖、凋亡、侵襲的影響，為臨床用藥提供理論依據。在機制研究中，借助基因編輯技術，科學家深入探究 APC、KRAS 等基因突變與結直腸癌發(fā)生發(fā)展的關聯，以及相關信號通路的調控機制，為靶向治療奠定基礎。此外，DiFi 細胞系還用于評估聯合治療方案的效果，如hua療聯合靶向治療、免yi治療聯合放療等，助力優(yōu)化結直腸癌治療策略，推動結直腸癌診療技術不斷進步。
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