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液相色譜儀之保護(hù)柱如何選擇

時間:2021/4/12閱讀:1500
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高效液相色譜儀高效液相分析檢測樣品的過程中,色譜柱會受到來自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染,從而導(dǎo)致色譜柱耐用性差、壽命縮短。

 

液相色譜儀器

來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指,HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒,以及流動相系統(tǒng)過濾不*殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指,未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進(jìn)入色譜系統(tǒng)中,由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。特別是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質(zhì)的復(fù)雜性,色譜柱受污染的情況會更加嚴(yán)重。污染會導(dǎo)致液相色譜儀色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等,從而帶來檢測成本高,測試結(jié)果不準(zhǔn)確等各種影響。

以下幾種情況建議使用保護(hù)柱:

1.中藥、天然產(chǎn)物及合成中間體等基質(zhì)較復(fù)雜的樣品分析——因溶解性差異導(dǎo)致樣品析出而污染分析柱的情況比較嚴(yán)重,梯度洗脫時影響更大。

2.生物樣品分析——因樣品的不可逆吸附導(dǎo)致的污染,保護(hù)柱可先于分析柱承受這種污染,從而延長分析柱壽命。

保護(hù)柱很重要,但選擇合適的保護(hù)柱更重要,選擇或使用不當(dāng)也可能帶來截然相反的效果。

保護(hù)柱使用注意事項:

1.獨(dú)立式保護(hù)柱與分析柱連接時,連接管路盡可能短,且接口切面平滑,盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。

2.高效液相色譜儀卡套式保護(hù)柱一般未標(biāo)注液流方向,使用時*自行標(biāo)注,并按照標(biāo)注方向來使用,以免正反向使用后,截留的雜質(zhì)污染分析柱。

3.直接填裝的短柱型保護(hù)柱,出現(xiàn)柱壓升高或峰型變差時,可不接分析柱進(jìn)行反向清洗,清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。

4.卡套式保護(hù)柱,柱芯替換時,注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配,同時不易旋擰過緊,以防滑絲。

5.保護(hù)柱或柱芯一般不建議超聲清洗,因可能對填料表面修飾有影響。

6.如同一保護(hù)柱配不同的分析柱使用,每次使用前,保護(hù)柱需先清洗并用流動相平衡保護(hù)柱一段時間后,再接分析柱使用。

高效液相色譜儀保護(hù)柱與柱前過濾器的區(qū)別和使用:

使用保護(hù)柱的目的在于延長分析柱的使用壽命,當(dāng)分析柱造價昂貴時,保護(hù)柱的價值尤其能體現(xiàn),某些情況下,當(dāng)使用的分析柱本身價格便宜,保護(hù)柱并非必選,推薦使用柱前過濾器更合適。

柱前過濾器與保護(hù)柱兩者外形相似,差異主要在于:保護(hù)柱內(nèi)芯裝有填料,而柱前過濾器內(nèi)芯是可更換的濾片(一般為帶孔的不銹鋼燒結(jié)板)

因此,從結(jié)構(gòu)可以推測使用上的差異:

柱前過濾器——通用性強(qiáng),任何分析柱前都可使用,因其濾芯只起到過濾和截留雜質(zhì)的作用,濾片污染后可超聲清洗,反復(fù)使用。

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