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如何提高色譜柱的效率

時間:2021/4/13閱讀:2341
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色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項重要指標,混合物能否在色譜柱中得到分離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關。那么,如何有效地提高色譜柱的柱效呢?

 

液相色譜柱 PepMap 100 C18 賽默飛色譜柱耗材

在一定的色譜操作條件下,色譜柱的柱效可用理論塔板數(shù)或理論塔板高度來衡量。一般說來塔板數(shù)愈多,或塔板高度愈小,色譜柱的分離效能愈好。

要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。以下介紹了幾種國際上流行的測量和計算柱效值的方法。

(1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。

 (2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。

 (3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。

 (4)選用低粘度的移動相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。

 (5)適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。

(6)盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。

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