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高效液相色譜法(HPLC)概述

時間:2021/7/14閱讀:6437
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高效液相色譜(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發(fā)展起來的一項高效、快速的分析分離技術(shù),是現(xiàn)代分離測試的重要手段。

色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過固定相時,由于與固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。

高效液相色譜(HPLC)是在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,其以液體作為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。其分離機制與常規(guī)柱色譜相同,但填料更加精細,需高壓泵推動,柱效高,分析速度快。

與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程,其組成、比例和pH值可靈活調(diào)節(jié),分離模式多樣。在實際操作中主要通過改變流動相的組成來調(diào)節(jié)樣品在色譜柱的保留值和選擇性,從而使不同樣品得到分離。

高效液相色譜(HPLC)的應(yīng)用范圍十分廣泛,對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定,因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中,可用氣相色譜分析的約占20% ,而80% 則需用高效液相色譜來分析。


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