流動(dòng)相溶劑瓶的保養(yǎng)

溶劑瓶是流動(dòng)相的起點(diǎn)，通常盛放水相或有機(jī)相溶液。

1.對(duì)于水相溶液，首要的問(wèn)題是防止污染。對(duì)于溶劑瓶我們要勤換流動(dòng)相，常換常新。

2.對(duì)于有機(jī)相溶液，有機(jī)相易發(fā)生聚合，特別是乙腈在適宜的光照條件下極易發(fā)生聚合，瓶中會(huì)出現(xiàn)絮狀的聚合沉淀物。

為防止聚合，盛裝乙腈時(shí)要用棕色溶劑瓶，避免陽(yáng)光直射，更換乙腈時(shí)應(yīng)棄去瓶底剩余的溶液。

3.清洗過(guò)濾，溶劑瓶的過(guò)濾頭，其作用是防止溶液瓶中的顆粒雜質(zhì)進(jìn)入儀器流路系統(tǒng)，其材質(zhì)通常分為玻璃燒結(jié)石英和不銹鋼，如果不慎堵塞會(huì)造成流動(dòng)相吸液不暢，因此必須進(jìn)行清洗。

玻璃材質(zhì)的通常用稀硝酸泡，而不銹鋼材質(zhì)的可直接進(jìn)行超聲清洗。

高壓泵的保養(yǎng)

泵是液相色譜的核心。泵將流動(dòng)相從溶劑瓶輸送到液相流路系統(tǒng)中，并要在高壓下保持流量和壓力的穩(wěn)定。

狀態(tài)正常的高壓泵是液相色譜準(zhǔn)確分析的基礎(chǔ)，所以要重視對(duì)泵的維護(hù)。

1泵壓力波動(dòng)，很多情況下，泵的問(wèn)題反映在壓力上，壓力波動(dòng)是常見(jiàn)的一類問(wèn)題。通?？赏ㄟ^(guò)重新清洗流路和再次脫氣流動(dòng)相加以解決。

2過(guò)濾白頭保養(yǎng)，泵的維護(hù)還有一項(xiàng)常做的工作是更換清洗閥上的過(guò)濾白頭，通常判斷的標(biāo)準(zhǔn)是純水以5mL/min流速清洗時(shí)，如果壓力超過(guò)1MPa則考慮更換。

進(jìn)樣器的保養(yǎng)

進(jìn)樣器分手動(dòng)和自動(dòng)兩大類，雖然兩者工作模式不同，但使用要點(diǎn)基本一致。

1.防止交叉污染，自動(dòng)進(jìn)樣器常見(jiàn)的問(wèn)題是交叉污染，交叉污染產(chǎn)生的原因是，樣品殘留在進(jìn)樣針內(nèi)外表面，并隨下一次進(jìn)樣進(jìn)入色譜系統(tǒng)。要解決交叉污染，主要靠清洗。

2.精細(xì)操作，手動(dòng)進(jìn)樣器的操作要點(diǎn)大致相同，應(yīng)使用液相色譜專用進(jìn)樣針，進(jìn)樣時(shí)插針應(yīng)插到底，不使用時(shí)將針頭留在進(jìn)樣器內(nèi)，使用前后都要及時(shí)清洗。

色譜柱的保養(yǎng)

色譜柱是化合物分離的關(guān)鍵。保養(yǎng)良好的色譜柱具有很高的塔板數(shù)，且儀器基線平穩(wěn)。

1.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會(huì)影響柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩。

2.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/span>

3.色譜柱反沖，納譜分析小分子分離液相色譜柱ChromCore系列和EcoPak系列色譜柱可以反沖；納譜分析手性色譜柱UniChiral系列色譜柱可以反沖，反沖可除去留在柱頭的雜質(zhì)。但是納譜分析生物大分子液相色譜柱BioCore系列色譜柱不要反沖，否則反沖會(huì)迅速降低柱效。

4.選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。可在進(jìn)樣器前連接預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和"，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

5.避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱應(yīng)經(jīng)常更換。

6.經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí)，對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡，每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50~75mL。

7.保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。

8.色譜柱使用過(guò)程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時(shí)應(yīng)更換濾片或取出清洗；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。

在后兩種情況發(fā)生時(shí)，小心擰開(kāi)柱接頭，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取凈），再把柱內(nèi)填料整平。然后用適當(dāng)溶劑濕潤(rùn)的固定相（與柱內(nèi)相同）填滿色譜柱，壓平，再擰緊柱接頭。

檢測(cè)器的保養(yǎng)

1、光源部分

檢測(cè)器中非常重要的部件是光源，光源對(duì)發(fā)射能量有要求，一旦能量衰減到一定程度，就會(huì)出現(xiàn)基線噪聲變大、靈敏度降低等問(wèn)題，因此光源是一個(gè)消耗品。通常紫外燈的壽命是2000h，要特別關(guān)注燈的能量狀況。

可通過(guò)儀器維護(hù)軟件中自帶的“燈能量測(cè)試"功能來(lái)判斷，測(cè)試的結(jié)果會(huì)分別評(píng)估低、中、高三個(gè)波長(zhǎng)段的能量，一旦某個(gè)波長(zhǎng)段的測(cè)試結(jié)果顯示失敗，就表示需要更換燈。

2、檢測(cè)池

檢測(cè)器中另一重要部件是檢測(cè)池，也叫流通池。通常大家關(guān)心的問(wèn)題是檢測(cè)池被堵掉，因?yàn)闄z測(cè)池通常不耐壓，所以一旦被堵就很可能造成損壞。

事實(shí)上檢測(cè)池通常不容易被堵，原因是幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會(huì)被色譜柱攔截，所以堵塞檢測(cè)器的物質(zhì)基本都不是來(lái)自樣品，很可能是后來(lái)“產(chǎn)生"的，比如含鹽流動(dòng)相殘留在檢測(cè)池中導(dǎo)致鹽析出。

廢液的處置

液相色譜儀的廢液大部分含有有機(jī)溶劑，會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的危害，對(duì)環(huán)境也會(huì)產(chǎn)生污染，嚴(yán)禁隨意傾倒，應(yīng)及時(shí)處理。目前，國(guó)內(nèi)大部分實(shí)驗(yàn)室是將廢液送到專門的廢液處理站集中進(jìn)行無(wú)害化處理。