GRE-Luc A549 GRE-Luc A549 GRE-Luc A549
| I. Background | |
| 糖皮質(zhì)激素（GC） 是類固醇激素，它們在炎癥、生長、代謝和發(fā)育中的多種作用， 對許多生理功能具有重要影響。由于其抗增殖和抗炎特性，GCs 幾十年來一直被用于治療 惡性腫瘤以及各種炎癥和自身免疫性疾病。 由腎上腺皮質(zhì)產(chǎn)生的內(nèi)源性 GC 受到 HPA（下丘腦-垂體-腎上腺）軸的嚴(yán)格調(diào)控，它 們的親脂性使它們能夠輕松地通過細(xì)胞膜擴(kuò)散。在細(xì)胞內(nèi)，GCs 通過糖皮質(zhì)激素受體(GR) 介導(dǎo)其作用，糖皮質(zhì)激素受體是屬于核激素受體超家族的轉(zhuǎn)錄因子。在不存在 GC 的情況 下，GR 與分子伴侶蛋白形成復(fù)合物被隔離在細(xì)胞質(zhì)中；當(dāng)它存在于細(xì)胞質(zhì)中時，分子伴 侶蛋白保持其非活性狀態(tài)并組織受體的結(jié)構(gòu)構(gòu)象以接受配體。配體結(jié)合后，GR 變得活躍 并在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核之間動態(tài)穿梭，作為轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮作用，正向和負(fù)向調(diào)節(jié)許多依賴于 GR 的基因。 GR 的轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)主要由 GR 同源二聚體與包含糖皮質(zhì)激素反應(yīng)元件（GREs） 的啟動子 區(qū)域結(jié)合觸發(fā)，這種機(jī)制稱為 GR 依賴性反式激活（TA）。另一方面，GR 依賴的反式抑 制（TR）是由 GR 與 DNA 結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子如 NF-κB 和激活蛋白-1 （AP-1）相互作用介導(dǎo) 的，導(dǎo)致各自的抑制炎癥信號級聯(lián)。一些患有糖皮質(zhì)激素抵抗型哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 潰瘍性結(jié)腸炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、急性淋巴細(xì)胞白血病或慢性淋巴細(xì)胞白血病的患者的 GR 水平升高。 | |
| II. Description | |
GRE-Luc A549 報告基因細(xì)胞，是由 GRE 調(diào)控并表達(dá) Luc 熒光素酶報告 基 因的 A549 細(xì) 胞。 Dexamethasone （Hexadecadrol）是 糖皮質(zhì)激素受體 （Glucocorticoid Receptor）激動劑、凋亡誘導(dǎo)劑，原理見下圖所示。 Figure 1. GRE-Luc A549 細(xì)胞原理示意圖 | |
| II. Introduction | |
| Host Cell: | HEK293 |
| Expressed gene: | GR-GAL4 Luciferase |
| Stability: | 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | F12K+10%FBS+300 μg/ml hygromycin |
| Storage: | Liquid nitrogen |
| III. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Homo sapiens, human |
| Tissue: | Lung |
| Disease: | Carcinoma |
| Morphology: | Epithelial cells, growing adherently as monolayer |
| Growth Properties: | Adherent |
| IV. Representative Data | |
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Figure 2. Dose Response of Dexamethasone in GRE-Luc A549(C34). | |
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