樣本采集:依據(jù)檢測需求采集適量樣本。血清樣本需采集靜脈血,室溫靜置待血液自然凝固后離心獲取;血漿樣本則在采血時加入合適抗凝劑,再經(jīng)離心處理;細胞培養(yǎng)上清在細胞培養(yǎng)結束后,經(jīng)離心去除細胞碎片等雜質獲得;組織勻漿需將新鮮組織經(jīng)預處理后,在特定緩沖液中勻漿,再離心取上清。采集過程必須嚴格遵循無菌操作規(guī)范,防止樣本污染。若采集后的樣本不能立即檢測,應妥善保存于 - 20℃冰箱,避免 IL-17RC 降解或活性改變。
試劑盒準備:從冰箱取出試劑盒,在室溫(20℃ - 25℃)下平衡 30 分鐘,確保試劑盒內各試劑溫度均勻。同時準備好移液器、吸頭、酶標儀等實驗器材,并檢查其性能是否正常,為檢測工作的順利開展做好充分準備。
加樣:將標準品、待測樣本及空白對照按規(guī)定體積準確加入微孔板相應孔中,輕輕振蕩混勻,使樣本與包被抗體充分接觸,隨后在設定溫度下孵育一定時間,促進抗原抗體反應充分進行。
洗板:孵育結束后,棄去孔內液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次,徹di清除未結合的物質,有效降低非特異性信號干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干,防止殘留液體影響后續(xù)反應結果。
加酶標抗體:向各孔加入適量酶標抗體,振蕩混勻后再次孵育,使酶標抗體與已結合的 IL-17RC 充分結合。
顯色與終止:加入底物顯色液,在避光條件下孵育,待顏色變化至合適程度時,加入終止液終止反應,使反應停止在最佳檢測狀態(tài),便于準確讀取結果。
結果測定:立即使用酶標儀在規(guī)定波長下測定各孔 OD 值,根據(jù)標準曲線計算出樣本中 IL-17RC 的含量。
高靈敏度:能夠檢測到極低含量的 IL-17RC,有助于發(fā)現(xiàn)早期或微小的生理病理變化,為精準診斷和深入研究提供有力支持。
特異性強:試劑盒中的抗體對 IL-17RC 具有高度特異性,與其他受體或蛋白交叉反應極小,保證檢測結果的準確性,有效減少誤診和漏診情況的發(fā)生。
操作簡便:整個檢測流程相對標準化,操作步驟清晰明了,經(jīng)過簡單培訓的人員即可熟練操作,適用于各級醫(yī)療機構和實驗室開展檢測工作。
結果穩(wěn)定:在規(guī)定的保存條件下,試劑盒內各試劑性能穩(wěn)定,多次檢測同一批樣本,結果重復性良好,為臨床診斷和科研工作提供可靠的數(shù)據(jù)支撐。