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姬姆薩染色液(Giemsa Stain,1:9)說明書

時間:2025/4/11閱讀:384
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產(chǎn)品簡介:

姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。Giemsa 染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同,姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對胞核著色偏深, 核結(jié)構(gòu)顯色不佳,故姬姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。Giemsa Stain 以進(jìn)口的姬姆薩色素、甲醇為主要原料,含有襯染劑,經(jīng)研磨配制而成,能呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞染色效果,經(jīng)常用于組織切片、血液和細(xì)胞涂片、細(xì)菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。

自備材料:

1、 載玻片、顯微鏡

2、 蒸餾水、甲醇、0.1~0.5%乙酸

操作步驟(僅供參考):

(一)一步法涂片染色

1、Giemsa 工作液的配制:按試劑(A):試劑(B)=1:9 混合,即取1份 Giemsa Stain 儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為Giemsa 工作液,為即用型試劑, 不易保存,即用即配。

2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。

3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加Giemsa工作液覆蓋涂片,室溫滴染15~

30min。

4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。干燥、鏡檢。

(二)兩步法涂片染色

1、Giemsa 工作液的配制:按試劑(A):蒸餾水=1:4 混合,即取1份的 Giemsa Stain儲存液(10×)加入到4份的蒸餾水中充分混勻,即為 Giemsa 工作液;Giemsa 工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。

2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。

3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加適量Giemsa 工作液覆蓋涂片,室溫滴染10~15min。

4、加入等量磷酸鹽緩沖液,輕輕晃動載玻片,室溫靜置 5~10min。

5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。干燥、鏡檢。

(三)組織切片染色

1、Giemsa 工作液的配制:按試劑(A):試劑(B) =1:9 混合,即取1份Giemsa Stain 儲存液(10×)加入到9份磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為Giemsa工作液;Giemsa工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。

2、新鮮組織立即置于Regaud 固定液固定2天,期間應(yīng)更換1次固定液。

3、3%重鉻酸鉀固定1天。

4、流水沖洗16個小時或過夜。

5、常規(guī)脫水、包埋。

6、切片厚度約為5μm,常規(guī)脫蠟至水。

7、蒸餾水清洗2次,每次1min。

8、入含Giemsa工作液染缸浸染 18~24h,蒸餾水稍微清洗。

9、0.1~0.5%乙酸洗 1~2min,自來水稍洗。

有效期:24個月有效。



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