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導(dǎo)讀

隨著生物醫(yī)藥技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的生物藥陸續(xù)上市，如治療慢性疾病的寡核苷酸藥物Leqvio，“一年只需注射兩針”就可以長(zhǎng)效持久的降低血液中膽固醇含量，以及用于治療II型糖尿病的多肽類藥物Mounjaro。在寡核苷酸和多肽藥物的質(zhì)量控制中，分子量測(cè)定是定性表征中不可缺少的一部分，而單四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀（LCMS）是測(cè)定分子量的利器。但與小分子藥物相比，多肽和寡核苷酸藥物極性和分子量均較大，在LCMS中帶多電荷，所以分子量測(cè)定時(shí)可能會(huì)存在分子量測(cè)定范圍窄、靈敏度低等問(wèn)題。

小身材大智慧 LCMS-2050

島津最新款單四極桿質(zhì)譜儀LCMS-2050兼顧小型化和高性能，其離子源為加熱型ESI/APCI（DUIS）源，使得寡核苷酸和多肽藥物等分子量較大的極性化合物更容易電離，所以LCMS-2050具有分析靈敏度高，分子量測(cè)定范圍廣的特點(diǎn)。此外，島津LabSolutions軟件自帶分子量解卷積功能，可以快速對(duì)多電荷質(zhì)譜圖進(jìn)行解卷積，獲得分子量相關(guān)信息。

分子量測(cè)定案例分享

寡核苷酸藥物

本方案中寡核苷酸藥物為小干擾核苷酸（siRNA），是一類雙鏈RNA分子（正義鏈和反義鏈），長(zhǎng)度為20-25個(gè)堿基對(duì)。通過(guò)流動(dòng)相的調(diào)整和質(zhì)譜參數(shù)的優(yōu)化，LCMS-2050（負(fù)模式）檢測(cè)得到了siRNA多電荷質(zhì)譜圖，質(zhì)荷比為600~1700。此時(shí)質(zhì)譜圖中無(wú)其他加和離子干擾，且高質(zhì)荷比也有明顯響應(yīng)。

通過(guò)島津LabSolutions軟件自帶的多電荷解卷積功能，計(jì)算得到siRNA正義鏈電荷數(shù)量為4~11，分子量為6631.64 Da，反義鏈電荷數(shù)量為4~10，分子量為6637.66 Da，與理論值的偏差均小于0.4 Da。

siRNA色譜圖

正義鏈質(zhì)譜圖

正義鏈分子量解卷積結(jié)果

反義鏈質(zhì)譜圖

反義鏈分子量解卷積結(jié)果

 多肽藥物

此多肽藥物為一種生長(zhǎng)抑素，其理論分子量為1637. 72 Da。LCMS-2050（正模式）檢測(cè)得到質(zhì)荷比為546.76~1638.47，通過(guò)LabSolutions解卷積功能計(jì)算得到分子量為1637.45 Da，與理論值偏差為0.27 Da。

多肽藥物色譜圖

多肽藥物質(zhì)譜圖

多肽藥物分子量解卷積結(jié)果

結(jié)語(yǔ)

島津最新款單四極桿質(zhì)譜儀LCMS-2050兼顧小型化與高性能，適用于多肽、寡核苷酸等化合物分子量測(cè)定，具有靈敏度高、分子量測(cè)定范圍廣的優(yōu)勢(shì)。

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《LCMS測(cè)定小干擾核苷酸siRNA分子量》

《LCMS-2050在多肽分子量定性分析檢測(cè)中的應(yīng)用》

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