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GB/T 42699.2-2023《紡織品 某些動(dòng)物毛纖維蛋白質(zhì)組定性和定量分析 第2部分：還原蛋白質(zhì)多肽分析基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF-MS）法》，在2023-08-06正式發(fā)布，將在2024-03-01正式實(shí)施。該國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)由 TC209（全國(guó)紡織品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)）歸口，TC209SC1（全國(guó)紡織品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)分會(huì)）執(zhí)行 ，主管部門(mén)為中國(guó)紡織工業(yè)聯(lián)合會(huì)。

標(biāo)準(zhǔn)概要

n                      該標(biāo)準(zhǔn)修改采用ISO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：ISO 20418-2：2018。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)是基于島津MALDI-TOF系統(tǒng)上開(kāi)發(fā)，并在日本發(fā)行。

n                      國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的差異其中之一是將國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)采用的帶反射模式（島津AXIMA Performance），更改為反射模式或線性模式。適用MALDI-TOF機(jī)型擴(kuò)展為線性模式的臺(tái)式機(jī)MALDI-TOF同時(shí)適用標(biāo)準(zhǔn)。

n                      該標(biāo)準(zhǔn)目的是確立采用MALDI-TOF法測(cè)定紡織品中動(dòng)物毛纖維混合物組分的定性定量方法。

動(dòng)物毛纖維蛋白質(zhì)組定性和定量分析MALDI-TOF法原理

使用十二烷基磺酸鈉（SDS）/二硫蘇糖醇（DTT）/磷酸鹽緩沖液，提取動(dòng)物毛發(fā)中的蛋白質(zhì)。提取的蛋白質(zhì)經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）純化，再經(jīng)胰蛋白酶對(duì)凝膠中的蛋白質(zhì)進(jìn)行酶解。使用MALDI-TOF-MS對(duì)物種特異的蛋白質(zhì)比例進(jìn)行分析。對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出混合物中各動(dòng)物毛纖維的含量。

物種特異峰值出現(xiàn)的分子量范圍為2450 m/z~2750 m/z，各種動(dòng)物毛纖維特種峰值在標(biāo)準(zhǔn)中已列出：

動(dòng)物毛發(fā)鑒別分析技術(shù)在各個(gè)領(lǐng)域都起著重要作用。獸毛被用于制作外套、上衣、毛衣等各種纖維制品。制作這樣的纖維制品時(shí)，有義務(wù)根據(jù)家庭用品品質(zhì)標(biāo)識(shí)法對(duì)纖維的種類(lèi)、使用多種纖維時(shí)的混用率進(jìn)行標(biāo)識(shí)。另外，毛發(fā)混入食品中時(shí)，確定毛發(fā)種類(lèi)對(duì)明確混入途徑至關(guān)重要。

經(jīng)過(guò)胰蛋白酶處理的多肽采用MALDI-TOF MS分析。用MALDI-TOF MS檢測(cè)金屬靶板上的結(jié)晶樣品。調(diào)整激光功率等的檢測(cè)條件，確保在觀察動(dòng)物種類(lèi)特異性峰值的m/z2450-2750領(lǐng)域能得到良好的分辨率。通過(guò)對(duì)SDS-PAGE蛋白條帶進(jìn)行胰蛋白酶解后的樣品，進(jìn)行MALDI-TOF MS檢測(cè)。

通過(guò)MALDI-TOF MS技術(shù)找到山羊絨、羊毛、牦牛毛三者之間的差異峰值區(qū)間m/z   2450-2750和特異峰值。如圖所示。

MALDI-TOF MS 中的動(dòng)物物種類(lèi)特異性峰值

島津應(yīng)對(duì)方案和機(jī)型

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