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島津應用：利用LC-MS/MS 考察 CHO 細胞
細胞培養(yǎng)基是人工模擬細胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境，為促進細胞生長增殖提供物質基礎，是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。合成細胞培養(yǎng)基是用化學成分明確的試劑配制的培養(yǎng)基，是目前常用的一類培養(yǎng)基，其組分穩(wěn)定，主要包括糖類、必需氨基酸、維生素、無機鹽類等。培養(yǎng)基組分的變化，對細胞生長會產(chǎn)生一定影響，如細胞生長形態(tài)、分裂速度等。同時，適宜的培養(yǎng)基組成與優(yōu)選的細胞培養(yǎng)工藝對于提高蛋白類藥物的產(chǎn)率，保證細胞培養(yǎng)批次之間的一致性、穩(wěn)定關鍵質量屬性等因素至關重要。因此，尋求一類合適的培養(yǎng)基組成，對細胞培養(yǎng)具有重大意義。細胞生長狀態(tài)的分析，除形態(tài)學觀察外，還可對細胞培養(yǎng)上清液中細胞代謝物進行分析，通過考察細胞上清液中營養(yǎng)物和代謝物的變化，判斷細胞在生長增殖過程中狀態(tài)的優(yōu)劣。鑒于此，我們開發(fā)了“細胞培養(yǎng)上清液方法包”，該技術可在 17 分鐘內(nèi)同時分析 95 種細胞培養(yǎng)上清液營養(yǎng)成份和代謝物的相對豐度變化。
本文使用島津超液相色譜儀 LC-30A 和三重四極桿質譜 LCMS-8060 聯(lián)用，結合“細胞培養(yǎng)上清液方法包”建立了細胞培養(yǎng)上清液中營養(yǎng)物質和細胞代謝物的液相色譜-串聯(lián)質譜的同時分析方法，為相關研究人員評估細胞生長狀態(tài)、改進培養(yǎng)基組分提供參考。
島津三重四極桿質譜 LCMS-8060
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