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臺(tái)盼藍(lán)染色液使用指導(dǎo)!
臺(tái)盼藍(lán)常用作細(xì)胞活性染料,用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性,檢測(cè)細(xì)胞是否存活?;罴?xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色,而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬,故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。
產(chǎn)品名稱:臺(tái)盼藍(lán)染色液(0.4%)
產(chǎn)品規(guī)格:50ml /100ml
產(chǎn)品分類:細(xì)胞染色
儲(chǔ)存條件:4℃
有效期:12個(gè)月
檢測(cè)原理:臺(tái)盼藍(lán)染色液又稱錐蟲(chóng)藍(lán)染色液,用于細(xì)胞染色,細(xì)胞計(jì)數(shù)。活細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色,而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬,故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過(guò)顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對(duì)細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量,0.4%為常用的濃度。
實(shí)驗(yàn)步驟(僅供參考):
1.收集細(xì)胞
用胰酶或EDTA消化貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞可直接收集。收集細(xì)胞時(shí)用1000-2000rpm離心棄上清,制備單細(xì)胞懸液,并做適當(dāng)稀釋。
2.臺(tái)盼藍(lán)染色:
細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以9:1比例混勻,染色3分鐘。
3.細(xì)胞計(jì)數(shù):
吸取少量經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。死細(xì)胞著藍(lán)色并膨大,無(wú)光澤;活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài),有光澤。通常要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500個(gè)細(xì)胞。細(xì)胞存活率(%)=活細(xì)胞總數(shù)/(活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù))x100%
注意事項(xiàng):
1.染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致活細(xì)胞逐漸積累染色而著色,降低實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
2.染色前若有沉淀,需過(guò)濾掉沉淀后再使用。
3.為了您的安全與健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作實(shí)驗(yàn)。
4.本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!
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