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出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1.解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為106至107細(xì)胞/毫升。2.解凍過(guò)程中的問(wèn)...
一、怎樣凍存動(dòng)物細(xì)胞?細(xì)胞冷凍過(guò)程有四個(gè)要點(diǎn):細(xì)胞的收獲、保護(hù)劑的使用、冷凍速率和儲(chǔ)存環(huán)境。(1)細(xì)胞的收獲用來(lái)凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿(mǎn)90%的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲...
1.怎樣查到一個(gè)特定細(xì)胞株的相關(guān)知識(shí)和培養(yǎng)條件?ATCC(AmericanTypeCultureCollection)收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開(kāi)ATCC網(wǎng)頁(yè)的Cellsandhybridoma...
間質(zhì)干細(xì)胞的表面抗原通過(guò)流式細(xì)胞儀分析,間充質(zhì)干細(xì)胞特異性表面抗原有:SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、CD124。BMSC:是骨髓中除HSC以外的非造...
抗體由于性質(zhì)和所使用的儲(chǔ)存條件不同,其存儲(chǔ)的“保質(zhì)期”可能從幾周到幾年不等。盡管每個(gè)抗體存儲(chǔ)的最佳條件是*的,但我們還是能夠總結(jié)出一些關(guān)于抗體存儲(chǔ)建議和一般準(zhǔn)則??贵w的儲(chǔ)存時(shí)間取決于抗體固有的性質(zhì)和儲(chǔ)...
能量來(lái)源:谷氨酰胺L-谷氨酰胺是一種氨基酸,細(xì)胞的重要能量來(lái)源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。同時(shí)L-谷氨酰胺不穩(wěn)定,在中性的水溶液中會(huì)自發(fā)降解;降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞有毒性(對(duì)干細(xì)胞,原代細(xì)胞影響尤其大)。能...
1、基本介紹無(wú)血清培養(yǎng)基是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基相比,既能滿(mǎn)足細(xì)胞在體外長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)的要求,又能避免動(dòng)物血清所帶來(lái)的不利因素。無(wú)血清培養(yǎng)基的發(fā)展歷程一般分為無(wú)血清培養(yǎng)基(Seru...
干細(xì)胞老化的表現(xiàn)細(xì)胞胞漿內(nèi)特別是在核區(qū)附近出現(xiàn)黑色顆粒,表示細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)老化;細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡,則表明該細(xì)胞已老化或者已經(jīng)開(kāi)始分化(在全部細(xì)胞中出現(xiàn)少數(shù)老化細(xì)胞是正常的);細(xì)胞立體感逐漸消失,細(xì)胞間...
血清沉淀是什么?血清中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的沉淀,其成分有多種類(lèi)型,產(chǎn)生的原因有很多,主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。1.纖維蛋白(Fibrin)血清中肉眼可見(jiàn)的沉淀物大多屬于這一類(lèi)型。由于在生...
許多細(xì)胞系容易適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)蛋白培養(yǎng)基,而對(duì)環(huán)境要求過(guò)高的其它細(xì)胞卻難以適應(yīng)變化,這就需要更為專(zhuān)業(yè)的方法來(lái)適應(yīng)變化。而根據(jù)細(xì)胞系的特性,有兩種方法可使細(xì)胞適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng)基。第一種方法是連續(xù)適應(yīng)/...
胰酶的作用原理是什么呢?胰酶是一種蛋白酶,酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個(gè)殘基的羧基端肽鏈,通過(guò)在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞膜上和培養(yǎng)皿結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時(shí)細(xì)胞在自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張...
復(fù)蘇細(xì)胞的正確打開(kāi)方式?復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過(guò)3分鐘)。解凍后的細(xì)胞...
培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因1.胰蛋白酶消化過(guò)度;2.支原體污染;3.培養(yǎng)基pH值過(guò)堿(NaHCO3分解);4.細(xì)胞老化;5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度;...
細(xì)胞培養(yǎng)物被支原體污染是極普遍的問(wèn)題,面對(duì)支原體污染給細(xì)胞培養(yǎng)帶來(lái)的巨大難題,世界各國(guó)開(kāi)始重視,并相繼建立了細(xì)胞庫(kù),對(duì)細(xì)胞質(zhì)量進(jìn)展控制,支原體污染的問(wèn)題得以限制。目前已知能污染細(xì)胞的支原體有20多種以...
碳吸附型血清是一款低水平類(lèi)固醇類(lèi)的血清產(chǎn)品,通過(guò)碳吸附可降低血清中許多激素及生長(zhǎng)因子的濃度,如雌二醇、皮質(zhì)醇、皮質(zhì)酮、B類(lèi)維生素、T3、T4、前列腺素等,該血清適用于上述一些分子可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)...
細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢是實(shí)驗(yàn)人員在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)常遇見(jiàn)的問(wèn)題,那么究竟是哪些因素影響?又如何改善呢?一.個(gè)別人的培養(yǎng)體系出現(xiàn)問(wèn)題1.檢查你所培養(yǎng)的細(xì)胞是否存在污染。(a)如果培養(yǎng)細(xì)胞未添加抗生素(必須添加!),細(xì)胞...
“黑膠蟲(chóng)”可寄生于動(dòng)物細(xì)胞,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠細(xì)胞和培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)為生,并隨細(xì)胞傳代而傳代。可見(jiàn)“黑膠蟲(chóng)”是一種異養(yǎng)生物。我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑膠蟲(chóng)后污染怎么辦?下面有幾個(gè)處理建議,我們一起來(lái)...
雙抗一、什么是雙抗?青霉素加上鏈霉素,俗稱(chēng)“雙抗”。二、培養(yǎng)液中需要加入雙抗嗎?加不加雙抗不是絕對(duì)的,視實(shí)際情況而定。如果你實(shí)驗(yàn)室條件足夠好,如果你操作足夠規(guī)范,就盡量不要加雙抗了。相反,如果你實(shí)驗(yàn)條...
原代細(xì)胞(primaryculturecell)是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳...
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)在所有的細(xì)胞離體培養(yǎng)中,困難的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清:動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)常常需要血清。常用的是小牛血清。血清提供生長(zhǎng)必需因子,如激素、微量元素、礦物質(zhì)和脂肪。在這里...
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