看完本篇你就知道什么是激光共焦顯微鏡了

閱讀：270發(fā)布時間：2023-2-24

　　激光共焦顯微鏡是一種高科技顯微鏡;它是在熒光顯微鏡成象的基礎上加裝激光掃描裝置，使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針，從而得到細胞或組織內(nèi)部微細結(jié)構(gòu)的熒光圖像，成為形態(tài)學、分子細胞生物學、神經(jīng)科學、藥理學、遺傳學等領域新一代強有力的研究工具。

　　在普通寬視野光學顯微鏡中，整個標本全部都被水銀弧光燈或氙燈的光線照明，圖像可以用肉眼直接觀察。同時，來自焦點以外的其他區(qū)域的熒光對結(jié)構(gòu)的干擾較大，尤其是標本的厚度在 2um 以上時，其影響更為明顯。

　　激光共聚焦顯微鏡脫離了傳統(tǒng)光學顯微鏡的場光源和局部平面成像模式，采用激光束作光源，激光束經(jīng)照明針孔，經(jīng)由分光鏡反射至物鏡，并聚焦于樣品上，對標本焦平面上每一點進行掃描。

　　組織樣品中如果有可被激發(fā)的熒光物質(zhì)，受到激發(fā)后發(fā)出的熒光經(jīng)原來入射光路直接反向回到分光鏡，通過探測針孔時先聚焦，聚焦后的光被光電倍增管(PMT)探測收集，并將信號輸送到計算機，處理后在計算機顯示器上顯示圖像。

　　在這個光路中，只有在焦平面的光才能穿過探測針孔，焦平面以外區(qū)域射來的光線在探測小孔平面是離焦的，不能通過小孔。因此，非觀察點的背景呈黑色，反差增加，成像清晰。

　　由于照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點同時聚焦于照明針孔與探測針孔，焦平面以外的點不會在探測針孔處成像，即共聚焦。

　　以激光作光源并對樣品進行掃描，在此過程中兩次聚焦，故稱為激光共焦顯微鏡。

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