1. 原代細胞抗原的密度
① 高表達的抗原可選擇幾乎所有的熒光素；
② 低密度表達的抗原需要可提供較高S/N比值的熒光素如PE/APC。

2. 自發(fā)熒光
① 每種細胞群都有不同水平的自發(fā)熒光；
② 所有的熒光通道均可觀察到自發(fā)熒光，但自發(fā)熒光強度在波長較長時迅速降低；
③ 對自發(fā)熒光較強的細胞，選擇發(fā)射波長較長的熒光素（如APC）可得到較好的S/N比值；
④ 對自發(fā)熒光比較弱的細胞，發(fā)射波長較長的熒光素對S/N提高沒有明顯的改善?？蛇x用FITC。

3. 非特異結合
① 許多熒光抗體可產(chǎn)生低水平的非特異結合，使陰性細胞群的熒光超出自發(fā)熒光；
② 非特異結合由下列因素引起：
單克隆抗體的同型抗體：一些IgG同型抗體可能與一些細胞上的Fc受體結合；
所用的熒光素：羰花青染料（如CY3、CY5、CY5.5、CY7）和Tex-Red直標的抗體及一些復合染料標記的抗體在標記某些亞群的細胞時有時會提高結合率；對CY5來說，是因為該染料與低親和力Fc受體的極低親和力相互作用。這也是復合染料PE-CY5的特性。

4. 復合染料：小心信號衰退
① 復合染料因為光、固定劑或溫度升高會致信號衰退，是復合染料在上一級染料處發(fā)光。該種現(xiàn)象從一小部分亞群開始，導致APC或PE染色細胞群假陽性；
② 減少樣本暴露于光、高溫或固定劑，可很大程度上避免這一問題；
③ 選擇染料時需要考慮：復合染料的信號衰退會不會降低APC或PE的靈敏度。如果是，就要選擇另外的試劑搭配；
④ 原代細胞如果樣本需要固定，要選擇穩(wěn)定的固定劑，可有效阻止復合染料的信號衰退。
L-4-Hydroxyisoleucine    HPLC≥98%    L-4-羥基異亮氨酸
        
Secoisolariciresinol Diglucoside    HPLC≥98%    亞麻木酚素(SDG)
α-mangostin    HPLC≥98%    α-倒捻子素
β-mangostin    HPLC≥98%    β-倒捻子素
3-isomangostin    HPLC≥98%    3-異倒捻子素
Cichoric Acid    HPLC≥98%    菊苣酸
    HPLC≥98%    梭砂貝母堿
Momordin Ic    HPLC≥98%    地膚子皂苷Ic
Pectolinarin    HPLC≥98%    大薊苷（柳穿魚葉苷）
2"-O-galloylhyperin    HPLC≥98%    2”-O-沒食子?；鸾z桃苷
9-methoxycamptothecine    HPLC≥98%    9-甲氧基喜樹堿
原代細胞