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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書重復(fù)性差的解決方法
閱讀：420 發(fā)布時(shí)間：2017-6-21elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。
1、樣品數(shù)量不一，加樣時(shí)間長短不一。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書解決方法：重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與*次接近。
2、樣品加入后未混勻。解決方法：加樣后在混勻器上充分混勻。
3、酶標(biāo)儀濾光片不對或輸入波長不對。解決方法：TMB顯色用450/630波長。
4、酶標(biāo)儀測定重復(fù)性差。解決方法：校對酶標(biāo)儀。
5、洗滌不正確。解決方法：洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時(shí)反應(yīng)板面向下，垂直用力甩凈內(nèi)容物（可多甩幾次），在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機(jī)洗板時(shí)不應(yīng)有堵孔，洗滌應(yīng)充分。
6、溫育條件不一致（一次用水育，一次用恒溫箱）。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書解決方法：恒溫箱溫育較水浴顯色深， OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。